咖啡酸苯乙酯誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過觀察不同濃度咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester, CAPE）處理的人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞中FAK、ERK及Caspase-3mRNA和蛋白表達(dá)水平變化，探討 CAPE誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)HT-29細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后予細(xì)胞種板，用10μg/ml的CAPE處理體外培養(yǎng)的結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞后，用無(wú)CAPE處理組和DMSO組作對(duì)照，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)FAK

2、和ERK蛋白表達(dá)變化；用不同濃度的CAPE（2.5、5.0、7.5、10μg/ml）處理體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞后，用無(wú)CAPE處理組和DMSO組作對(duì)照，應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)FAK、ERK和Caspase-3mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.免疫組織化學(xué)方法顯示：人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞中FAK和ERK蛋白表達(dá)均為陽(yáng)性，定位于細(xì)胞漿，經(jīng)10.0μg/ml的CAPE作用于HT-29細(xì)胞24h后，F(xiàn)AK和ERK蛋白表達(dá)減少，與

3、對(duì)照組間比較差異有顯著性(P<0.05或0.01)；2. RT-PCR結(jié)果顯示，經(jīng)2.5、5.0、7.5和10.0μg/ml的CAPE作用于HT-29細(xì)胞24h后，F(xiàn)AK和ERK mRNA表達(dá)隨CAPE濃度的增加而下降，Caspase-3 mRNA隨CAPE濃度的增加而上升。
　　結(jié)論：CAPE誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞的作用可能與其下調(diào)FAK、ERKmRNA和蛋白表達(dá)，上調(diào) Caspase-3mRNA的表達(dá)，從而干擾 FAK-Ras-M