促紅細(xì)胞生成素抑制C3介導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化.pdf

1、目的：觀察促紅細(xì)胞生成素（EPO）對(duì)C3a介導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響，以及促紅細(xì)胞生成素對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎臟纖維化的影響。
　　 方法：
　　 一 體外實(shí)驗(yàn)：將人近端腎小管上皮細(xì)胞（HK-2）分為6組：對(duì)照組、10U/ml EPO組、3ng/mlTGF-β組、3ng/ml TGF-β+10U/ml EPO組、0.1μM C3a組、10U/ml EPO+0.1μM C3a組；分別用RT-PCR、Wester

2、n Blot和細(xì)胞免疫熒光方法檢測(cè)HK-2細(xì)胞α-SMA、E-cadherin、C3 mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 二 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立腎單側(cè)輸尿管梗阻大鼠（UUO）模型，并把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分成假手術(shù)組、UUO對(duì)照組、EPO小劑量治療組（100U/Kg EPO）和EPO大劑量治療組（1000U/Kg EPO），在UUO術(shù)后第3至14天隔天腹膜內(nèi)注射給藥，所有大鼠在第14天給予甲烷麻醉后處死；觀察腎組織病理變化；免疫組化檢測(cè)各組大鼠腎臟組

3、織αSMA、E-cadherin和C3表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 一 體外實(shí)驗(yàn)：C3a和TGFβ干預(yù)HK2細(xì)胞后，α-SMA mRNA和蛋白表達(dá)增強(qiáng)，E-cadherin mRNA和蛋白表達(dá)減少，補(bǔ)體C3 mRNA和蛋白表達(dá)增強(qiáng)；而加入EPO干預(yù)后，則可抑制C3a和TGFβ的上述作用。
　　 二 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：UUO大鼠腎經(jīng)過EPO治療后，腎組織C3和α-SMA表達(dá)明顯減弱，E-cadherin表達(dá)明顯增強(qiáng)。