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1、目的:
研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠脊髓損傷修復(fù)的影響.
方法:
將80只SD大鼠隨機(jī)分成手術(shù)對(duì)照組(簡(jiǎn)稱對(duì)照組,n=15)、促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin,EPO)治療組(簡(jiǎn)稱EPO組,n=15)、大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)治療組(簡(jiǎn)稱BMSCs組,n=25)和BMSCs聯(lián)合EPO治療組(簡(jiǎn)稱聯(lián)合組,n=25)。造模后第7天EPO組經(jīng)腹腔注射促紅細(xì)胞
2、生成素,而B(niǎo)MSCs組、聯(lián)合組則經(jīng)損傷脊髓局部注射BMSCs和局部注射BMSCs的同時(shí)加用EPO腹腔注射。移植后第3d、1w、3w,BMSCs組、聯(lián)合組兩組分別應(yīng)用雙標(biāo)免疫熒光法檢測(cè)5-溴-2脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標(biāo)記BMSCs的神經(jīng)元中絲蛋白(NF-M)的表達(dá)情況,移植后第3周各組取脊髓組織作HE病理切片染色,再用免疫組化觀察神經(jīng)元中絲蛋白(NF-M)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)情況,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取5只大鼠,移植后第1d、1
3、w、2w、3w和4w,各組選10只大鼠分別用(BassoBeattie Bresnahan,BBB)法檢測(cè)大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)情況。所得數(shù)據(jù)采用組間均數(shù)比較t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
結(jié)果:
1、脊髓病理切片顯示聯(lián)合組較BMSCs組膠質(zhì)細(xì)胞增生更加活躍,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和組織水腫顯著減輕。
2、雙標(biāo)免疫熒光結(jié)果顯示移植的BMSCs在宿主脊髓中存活,從第7天開(kāi)始就有NF-M表達(dá)。免疫組化結(jié)果顯示聯(lián)合組中NF
4、-M和GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目均比其余組多(P<0.05)。
3、治療組脊髓損傷修復(fù)較對(duì)照組明顯,神經(jīng)功能BBB評(píng)分也明顯提高(P<0.05)。
4、聯(lián)合組在不同的時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能BBB評(píng)分都較EPO組、BMSCs組高。
結(jié)論:
1、BMSCs移植與EPO腹腔注射是治療大鼠脊髓損傷的有效方法;
2、促紅細(xì)胞生成素在體內(nèi)有誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的能力。
3
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