真菌3-脫氧葡糖醛酮代謝酶的研究.pdf

1、廣西大學碩士學位論文真菌3-脫氧葡糖醛酮代謝酶的研究姓名：莫柏立申請學位級別：碩士專業(yè)：應用化學指導教師：梁智群19980601￡墮查蘭堡主蘭焦墮奎S T U D I E S O N 3 一D E O X Y G L U C O S O N E —M E T A B O L I Z l N GE N Z Y M E F R O M F U N GA B S T R A C T3 - D e o x y g l u c o s o n e

2、 ， ah i g h l yr e a c t i v ea n d t o x i cc o m p o u n d ， i sa m a j o r i n t e r m e d i a t e i n t h e M a i l l a r d r e a c t i o n ．W e i s o l a t e d 3 -d e o x y g l u c o s o n e - m e t a b o l i z i n

3、g e n z y m e f r o m f u n g i i n o r d m ’t oi n h i b i t i n gt h eM a i l l a r dr e a t i o n ．’3 一D e o x y g l u c o s o n e w a s p r e p a r e d f r o m t h e d e g r a d a t i o np r o d u c t so f N —g l u c

4、 o s y l —b u t y l a m i n e ．A y e a s ts t r a i n ( S , c e r e v i s i a eY B r l M ) w a ss e l e c t e df r o mf u n g i ．T h es t r a i nh a s3 - d e o x y g l u c o s o n e —m e t a b o l i z i n ge n z y m ea n

5、 di t ’S a c t i v i t yi s f a i r l yh i g h ．T h eo p t i m u mc o n d i t i o n so fe n z y m ep r o d u c t i o nw e r ee x a m i n e d ．T h eo p t i m u mt e m p e r a t u r e ，i n i t i a lp H a n dc u l t i v a t

6、 et i m ef o r e n z y m e p r o d u c t i o n w e r e 3 0 ℃，p H 7 ．0 a n d 2 4 h o u r s ．T h es u i t a b l ec a r b o ns o u r c eo f t h em e d i u m w a sf r u c t o s ea n dt h es u i t a b l en i t r o g e ns o u

7、r c ew a sf i s hp e p t o n e ．E n z y m ea c t i v i t yc a ni n c r e a s eb ya d d i n gM g S 0 4 ‘7 ．0 H 2 0 ．3 一D e o x y g l u c o s o n e c a n i n d u c et h e e n z y m ep r o d u c t i o n ．A N A D P H —d e p

8、e n d e n t 3 - d e o x y g l u c o s o n e r e d u c t a s e f r o mS ．c e r e v i s i a e Y B r ．M i s o l a t e d a n d p u r i f i e d b y a m m o n i u n s u l f a t ef r a c t i o n a t i o n ，D E A E —c e l l u l

9、o s e 5 2 c o l u m n c h r o m a t o g r a p h y ，H y d r o x y a p a t i t e c o l u m n c h r o m a t o g r a p h y 、D E A E —s e p h a r o s e C L 一6 Bc o l u m nc h r o m a t o g r a p h y ．T h em o l e c u l a rw e