兩相體系中酶法制備膽甾-4-烯-3-酮的研究.pdf

1、甾體激素類藥物是世界上僅次于抗生素類藥物的第二大類藥物，在現(xiàn)代醫(yī)藥中有著十分重要的地位。甾體藥物的合成通常以薯蕷皂素、劍麻皂素、海柯皂甙元等為原料進(jìn)行化學(xué)半合成的方式來(lái)獲得。此外，還有化學(xué)全合成法和微生物轉(zhuǎn)化法合成甾體藥物。 膽甾-4-烯-3—酮，作為膽固醇的氧化產(chǎn)物，其本身具有抗肥胖、治療肝病、防止皮膚角質(zhì)化等作用。另外，其特定的結(jié)構(gòu)也可以作為甾體藥物中間體來(lái)使用。其生產(chǎn)方法主要有化學(xué)方法和生物方法，化學(xué)方法主要以膽固醇為原料

2、，通過(guò)多種催化劑的作用反應(yīng)制得，而生物方法主要通過(guò)產(chǎn)膽固醇氧化酶的菌株轉(zhuǎn)化得到。本論文主要對(duì)有機(jī)/水兩相體系中酶法制備膽甾-4-烯-3—酮進(jìn)行了研究，目的是得到一套簡(jiǎn)便、可以規(guī)模化生產(chǎn)膽甾-4-烯-3—酮的生產(chǎn)工藝。 首先，對(duì)有機(jī)相分別為石油醚、甘油、乙酸乙酯、異戊醇、乙酸丁酯、正己烷、癸烷、正十七烷的轉(zhuǎn)化體系進(jìn)行了比較研究。選擇了石油醚/水相兩相體系。在石油醚/水相兩相體系中，當(dāng)膽固醇濃度在低于20g/L時(shí)，5h內(nèi)的轉(zhuǎn)化率均在

3、90％以上，且產(chǎn)率約為4g.L-1 h-1；而氧氣能夠顯著的提高轉(zhuǎn)化率，但在加快的反應(yīng)同時(shí)也導(dǎo)致了酶活損失更快，對(duì)酶的損傷更大。 其次，對(duì)石油醚/水相兩相體系進(jìn)行了優(yōu)化。與單純用水相體系進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)經(jīng)48h后，石油醚/水相體系的轉(zhuǎn)化率達(dá)到了94.2％，單一的完全水相僅為42.3％；助劑對(duì)轉(zhuǎn)化具有促進(jìn)作用，Triton—Ⅹ100對(duì)轉(zhuǎn)化的促進(jìn)效果最好；酶經(jīng)三次重復(fù)使用之后，酶活仍接近50％；將全細(xì)胞轉(zhuǎn)化與酶促轉(zhuǎn)化進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)酶促