氧化應(yīng)激誘導(dǎo)自噬對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察氧化應(yīng)激是否可誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）自噬，探索在氧化應(yīng)激微環(huán)境中自噬對(duì)MSC增殖和凋亡的影響及可能機(jī)制，以期提高移植MSC治療糖尿病勃起功能障礙（DMED）的效果。
　　方法：以過(guò)氧化氫（H2O2）模擬氧化應(yīng)激微環(huán)境。臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞計(jì)數(shù)法及四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）檢測(cè)不同H2O2濃度（0、50、100、200、400μmol/L）對(duì) MSC增殖的影響。聯(lián)合 MTT、流式細(xì)胞術(shù)、Western blot及透射電鏡研

2、究H2O2對(duì)MSC凋亡及自噬的影響。
　　結(jié)果：H2O2明顯抑制MSC增殖，呈濃度依耐性，IC50=（384.5751±16.8895）μmol/L；Western Blot及透射電鏡提示H2O2在誘導(dǎo)MSC凋亡的同時(shí)，誘導(dǎo)MSC產(chǎn)生自噬；MTT及流式細(xì)胞術(shù)提示H2O2組細(xì)胞增殖受抑、凋亡率上升，阻斷自噬后細(xì)胞增殖進(jìn)一步減弱，凋亡率進(jìn)一步上升；Western blot結(jié)果提示H2O2誘導(dǎo)cleaved-caspase3增多及多聚

3、ADP-核糖聚合酶1（ PARP1）裂解增強(qiáng)，阻斷凋亡后cleaved-caspase3降低及PARP1裂解減弱，阻斷自噬后cleaved-caspase3進(jìn)一步增多及PARP1裂解進(jìn)一步增強(qiáng)。
　　結(jié)論：氧化應(yīng)激對(duì)MSC存活具有雙重作用，在誘導(dǎo)MSC凋亡的
　　同時(shí)還誘導(dǎo)保護(hù)性自噬，阻斷MSC自噬可以增加MSC的凋亡，因此進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)胞保護(hù)性自噬將有望提高移植MSC在糖尿病高氧化應(yīng)激微環(huán)境存活率，從而改善移植MSC對(duì)糖尿病