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文檔簡介
1、目的:探討非接觸共培養(yǎng)條件下人BMSCs對氧化應激誘導退變髓核細胞(Nucleus pulposus,NPCs)凋亡的保護作用。
方法:分離、培養(yǎng)人BMSCs和退變椎間盤NPCs,鑒定細胞表型。取第3代BMSCs和第1代NPCs分為:A組單純NPCs培養(yǎng);B組BMSCs與NPCs細胞比例1:1共培養(yǎng);C組BMSCs與NPCs細胞比例1:3共培養(yǎng);D組單純NPCs培養(yǎng),行凋亡誘導。B、C、D組分別于第3、7天加入H2O2誘導
2、NPCs凋亡。各時間點收集四組NPCs,DAPI染色觀察細胞核形態(tài),流式細胞儀量化細胞凋亡率,半定量RT-PCR檢測Bcl-2、Bax基因轉錄水平,Western-blot檢測Caspase-3蛋白含量。
結果:第3代BMSCs呈CD34-、CD45-、CD13+;NPCs于胞質內表達Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖。凋亡NPCs的細胞核固縮;共培養(yǎng)后B、C組NPCs凋亡率均低于D組,高于A組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05):共培
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