常規(guī)樹突狀細胞啟動和調(diào)控急性肺損傷早期炎癥反應的機制研究及樹突狀細胞靶向性的免疫調(diào)節(jié)治療探索.pdf

1、目的:
　　 明確肺常規(guī)樹突狀細胞(cDCs)對急性肺損傷(ALI)早期炎癥反應和肺損傷的啟動和調(diào)控效應及其具體的作用機制。
　　 方法:
　　 C57BL/6小鼠隨機分為正常對照組、0h-ALI組、6h-ALI組、24h-ALI組、FLT3-ligand(FLT3L)預處理組、來他替尼(lestaurtinib)預處理組和DMSO對照組，分別給予FLT3L、lestaurtinib預處理5天后復制ALI模型，6

2、h或24h后處死小鼠留取肺組織，采用流式細胞術檢測CD11c+CD11b+雙陽性細胞占肺單個核細胞的比例評價肺cDCs的數(shù)量，檢測肺cDCs表達MHCⅡ或CD80的比例評價肺cDCs的成熟程度;ELISA檢測肺IL-6、TNF-α的濃度評價肺部炎癥反應的強度;計算肺濕重/體重比評價肺水腫程度;肺組織HE染色行組織病理學檢查和肺損傷評分評價肺損傷程度;比色法檢測肺MPO活性評價中性粒細胞的浸潤;qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)錄因子T-bet及GAT

3、A-3mRNA的表達評價輔助性T細胞Th1/Th2亞群的漂移;ELISA檢測肺IFN-γ及IL-4水平評價肺組織Th1/Th2型細胞因子的平衡。
　　 結(jié)果:
　　 6h-ALI組肺cDCs占肺單個核細胞的比例(％)顯著高于0h-ALI組[(2.25±0.25)vs(0.93±0.40),P＜0.05]及24h-ALI組[(2.25±0.25)vs(1.01±0.28),P＜0.05]，其肺cDCs表達MHCⅡ的比例(％

4、)亦較0h-ALI組[(55.51±11.72)vs(6.67±0.87),P＜0.05]和24h-ALI組[(55.51±11.72)vs(10.94±2.55),P＜0.05]升<中文標題>=高。而與6h-ALI組相比，F(xiàn)LT3L預處理顯著增加ALI成模后6h肺cDCs占肺單個核細胞的比例(％)[(6.08±3.16)vs（2.25±0.25），P＜0.05]及其表達MHCⅡ的比例(％)[(73.15±9.07)vs(55.51±1

5、1.72)，P＜0.05]，還可上調(diào)成模后6h肺組織IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，并提高肺濕重體重比(P＜0.05)和肺病理損傷評分(P＜0.05)，此外FLT3L預處理組肺組織MPO活性、T-bet/GATA-3的表達比例和IFN-γ水平均較6h-ALI組顯著升高(均P＜0.05)。而與DMSO對照組相比，lestaurtinib預處理顯著降低ALI成模后6h肺cDCs占肺單個核細胞的比例(％)[(1.

6、41±0.13)vs(2.36±0.27)，P＜0.05]及其表達MHCⅡ的比例(％)[(41.56±8.18)vs(50.85±6.91)，P＜0.05]，還可下調(diào)成模后6h肺組織IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，減輕肺濕重體重比(P＜0.05)和肺病理損傷評分(P＜0.05)，此外lestaurtinib預處理組肺組織MPO活性、T-bet/GATA-3的表達比例和肺IFN-γ水平均較DMSO對照組顯著下