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文檔簡介
1、目的:研究miR-30a在BMP9誘導間充質(zhì)干細胞C3H10T1/2成骨分化中的作用,并探討其可能作用機制。
方法:首先用Ad-BMP9處理間充質(zhì)干細胞C3H10T1/2,通過堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒檢測早期成骨指標ALP、Western blot和PCR檢測中期成骨指標骨橋蛋白(OPN),茜素紅S染色檢測鈣鹽沉積了解BMP9對C3H10T1/2細胞的晚期成骨分化作用,同時用Real-time PCR檢測miR-30a在
2、該成骨分化中的變化。然后用BMP9條件培養(yǎng)基分別作用Ad-mmu-miR-30a和Ad-RFP預處理10h的C3H10T1/2細胞,檢測成骨指標ALP、OPN和鈣鹽沉積的表達。接著用流式細胞術和MTT法研究miR-30a對C3H10T1/2細胞增殖的影響。最后探討miR-30a在BMP9誘導C3H10T1/2細胞成骨分化中的可能作用機制。
結果:Ad-BMP9處理C3H10T1/2細胞7天后ALP活性的表達增高;第10天,OP
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