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1、目的:觀察發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子Hey1在骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic proteins9, BMP9)誘導(dǎo)的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成骨分化中的作用。
方法:包裝慢病毒 LV5-Hey1(過表達(dá) Hey1)和 LV5-BMP9(過表達(dá)BMP9),并分別作用于C3H10T1/2細(xì)胞,RT-PCR和Western blot檢測Hey1、BM
2、P9的慢病毒是否包裝成功;ELISA檢測早期成骨指標(biāo)堿性磷酸酶(ALP)的變化;晚期成骨指標(biāo)鈣鹽沉積使用茜素紅 S染色檢測;Hey1對BMP9調(diào)控的C3H10T1/2細(xì)胞增值的影響使用MTT技術(shù)檢測;使用流式細(xì)胞術(shù),用以檢測被 Hey1調(diào)控 BMP誘導(dǎo)后的C3H10T1/2細(xì)胞周期的影響。
結(jié)果:Hey1、BMP9的慢病毒包裝成功;在成骨分化早期,過表達(dá)Hey1基因可促進(jìn)BMP9調(diào)控的C3H10T1/2細(xì)胞的成骨分化與增殖;在
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