基于HPLC-MS-MS研究木犀草素在大鼠體內(nèi)的代謝行為.pdf

1、木犀草素是一種廣泛存在于蒲公英、何首烏、忍冬等草本植物中的黃酮類化合物，在藥理上具有抗腫瘤、抗過(guò)敏、抗炎、自由基清除及抗糖尿病等作用。木犀草素對(duì)催化Ⅰ、Ⅱ相代謝的酶，及對(duì)三相轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響有助于研究黃酮類化合物的臨床應(yīng)用，為中藥的現(xiàn)代化開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
　　本實(shí)驗(yàn)采用HPLC-HR-MS的分析方法，考察木犀草素在生物樣品中的體外穩(wěn)定性。分別測(cè)定了木犀草素在不同溫度(25℃、35℃、45℃)和不同pH(7.8～8.0、7.4、

2、4.5)模擬生物樣品緩沖液及大鼠尿液中的降解速率常數(shù)。木犀草素的降解遵循偽一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程，并且表現(xiàn)為溫度和pH依賴性。其中木犀草素于室溫(25℃)下在堿性、中性和尿樣中的降解速率常數(shù)分別為0.4216 h-1(r=0.9923)，0.1395 h-1(r=0.9740)及0.0889 h-l（r=0.9279）。而在酸性條件(pH4.5)下，木犀草素幾乎不隨溫度的改變而降解。結(jié)果表明，低溫和酸化(pH4.5)均利于木犀草素的生物樣品保持

3、相對(duì)穩(wěn)定，其中酸化是生物樣品采集的最適方法。
　　采用數(shù)據(jù)依賴性高分辨質(zhì)譜和多元數(shù)據(jù)處理技術(shù)，研究了木犀草素在大鼠體內(nèi)的代謝物情況。利用HPLC-MS/MS-UV方法和離子色譜提取(EIC)、子離子過(guò)濾(PIF)及中性丟失過(guò)濾(NLF)技術(shù)，檢測(cè)大鼠灌胃給予木犀草素20 mg·kg-1后尿液、糞樣和膽汁中的代謝產(chǎn)物。結(jié)果共檢測(cè)到22種代謝物，其中18種為首次發(fā)現(xiàn)。尿液中共22種，包括原形藥物和Ⅱ相代謝產(chǎn)物21種;糞樣中共2種代謝產(chǎn)