HPLC-MS-MS法測(cè)定人血漿中阿坎酸鈣濃度及人體藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分、HPLC-MS/MS法測(cè)定血漿中阿坎酸鈣濃度方法學(xué)研究。 目的:建立人血漿中阿坎酸鈣(Acamprosate calciuin，ACS)的HPLC-MS/MS測(cè)定方法。 方法:采用API 3000 LC/MS/MS液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)。Phenomenex Gemini C<,18>分析柱(50×3.0mm，3 μ m)l，流動(dòng)相為10 mmol.L<'-1>乙酸銨：甲醇=95：5(氨水調(diào)p

2、H：至7.4)，流速為0.2ml/min。樣品用乙腈沉淀蛋白，離心，定量取上清液揮干，二氯甲烷洗后進(jìn)樣，按外標(biāo)法定量。 結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)曲線在2～2048 μg.L<'-1>。范圍內(nèi)有良好線性，最低定量限為2μg.L<'-1>，ACS的保留時(shí)間為2.4min，日內(nèi)RSD小于4.0％，日間RSD小于11.6％，方法回收率在93％～104％，預(yù)處理回收率89.3％～95.6％。 結(jié)論:本法具有快速簡(jiǎn)便，靈敏準(zhǔn)確等特點(diǎn)，適用于ACS

3、血藥濃度測(cè)定及藥代動(dòng)力學(xué)、生物利用度研究。 第二部分、阿坎酸鈣人體藥代動(dòng)力學(xué)研究。 目的:研究ACS腸溶片的吸收、分布和代謝等規(guī)律。 方法:本研究對(duì)12例健康志愿者采用4×4拉丁方隨機(jī)給藥法，分別于四個(gè)周期內(nèi)空腹單次服用低(333mg)、中(666mg)、高劑量(1332mg)及隨餐服用中劑量(666mg)阿砍酸鈣腸溶片的藥代動(dòng)力學(xué)，另12例健康志愿者標(biāo)準(zhǔn)多次服用中劑量(666mg，每8 h服藥一次，每日3次，連

4、服7天)及10例健康志愿者隨餐多次服用中劑量(666mg，隨餐5min內(nèi)服藥，白天間隔6h，晚上12h)ACS腸溶片的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。采用液.質(zhì)聯(lián)用(LC-MS/MS)直接沉淀蛋白測(cè)定ACS血藥濃度，外標(biāo)法定量，用DAS 2.0藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理經(jīng)時(shí)血藥濃度數(shù)據(jù)，并對(duì)不同組間、性別間的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)用SPSS 10.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行了比較分析。 結(jié)果:單次服用低、中、高劑量及標(biāo)準(zhǔn)和隨餐多次服用ACS的藥動(dòng)學(xué)均符合一室開(kāi)放模型，

5、按一室開(kāi)放模型計(jì)算各組的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。單次空腹口服低、中、高三劑量組實(shí)測(cè)值計(jì)算平均C<,max>分別為134。8±103.9 μ g·L<'-1>、297.5±188.1 μ g·L<'-1>和385.4±155.7 μ g·L<'-1>；T<,max>分別為7.50±2.58 h、7.42±2.15 h和8.083±3.118 h；統(tǒng)計(jì)矩計(jì)算平均AUC<,0-t>分別為1771.5±323.1 μ g·L<'-1>·h、3708

6、.9±1194.9 μ g·L<'-1>·h、6421.2±2485.7 μ g·L<'-1>·h，Tm為9.96±4.69 h，10.97±8.60h和11.78±6.15 h；MRT<,0-t>、VRT<,0-t>、V<,l/F>、CL/F和T<,lag>分別為15.65±2.19 h～17.60±2.47 h、104.48±44.14 h<'2>～119.37±43.39 h<'2>、3069.9±1343.5 L～3248.3±

7、1360.7 L、225.2±99.2 L·h～211.7±74.7 L·h<'-1>和2.42±1.14 h～2.87±0.65 h；隨餐單次服用666mgACS腸溶片由于達(dá)峰時(shí)間長(zhǎng)(23.4±15.7 h)，多例受試者在吸收、分布和消除相血藥濃度點(diǎn)均較少，不能用于擬合藥時(shí)曲線，未予計(jì)算。標(biāo)準(zhǔn)和隨餐多次口服中劑量的AUC<,ss>、AUC<,0-t>、C<,max>、C<,min>、C<,av>、DF分別為3126.0±948.0 μ

8、 g L<'-1>·h和21 87.3±1 164.4 μ g L<'-1>·h、13513±5340 μ g L<'-1>·h和9163±4832 μ g L<'-1>·h、564.1±138.6 μ g L<'-1>·h和423.2+216.1μ g L<'-1>、419.0±156.7 μ g L<'-1>·h和300.1±164.6 μ g L<'-1>、390.8±118.5μ g L<'-1>和273.4±145.6 μ g

9、 L<'-1>、0.393±0.425和0.459±0.301，T<,max>、T<,1/2>、MRT<,0-t>、VRT<,0-t>、V<,1/F>、C<,1/f>分別為8.75±4.05 h和8.30±5.96 h、13.60±10.60 h和8.74±3.35 h、17.14±3.28 h和17.15±2.71 h、128.8±47.7 h<'2>和114.8±25.7 h<'2>、943_3±513.7 L和1478.8±11

10、85.9 L、60.9±36.0 L·h<'-1>和125_3±89.0 L·h<'-1>。 結(jié)論: SPSS 10.5統(tǒng)計(jì)軟件比較分析表明：不同性別間的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(除中劑量組CL/F外)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；單次給藥低、中、高不同劑量組間除AUC、C：(尾點(diǎn)回歸值)、Cma。參數(shù)外，其他主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)隨劑量改變的差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在333～1332 mg劑量范圍內(nèi)ACS藥物動(dòng)力學(xué)特征可能具有線性動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)。隨餐多劑