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文檔簡介
1、目的:
觀察熊果酸對實驗性肺氣腫大鼠肺泡壁細胞增殖和凋亡情況的影響。
方法:
將雄性Wistar大鼠32只隨機分4組:空白對照組、煙熏模型組、熊果酸10mg/Kg/d(UA-10)組、熊果酸20mg/Kg/d(UA-20)組,每組8只。
大鼠肺氣腫模型制備:采用自制熏煙玻璃箱(35cm×20cm×60cm),將大鼠每天放入煙熏箱中用實驗用香煙(紅金龍香煙,焦油量12mg,煙堿量1.1mg)熏煙1小
2、時(每天2次,每次30分鐘),每次16支香煙,每周6天,連續(xù)12周。
給藥:對照組大鼠每天放入自制玻璃箱(35 cm×20cm×60cm)內(nèi)1小時,不進行熏煙處理;模型組按上述肺氣腫模型制備方式行熏煙處理,每次熏煙前半小時用生理鹽水(10ml/Kg/d)灌胃;熊果酸10mg組和20mg組按上述熏煙處理前半小時用熊果酸(天津馬克生物技術(shù)有限公司)10mg/Kg/d、20mg/Kg/d分別灌胃。
染色:實驗12周后采用放
3、血法處死大鼠后,留取肺組織常規(guī)多聚甲醛固定、脫水、石蠟包埋、切片,分別行(1)HE染色;(2)增殖細胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen, PCNA)免疫組織化學(xué)染色,按說明書進行染色,細胞核棕褐色顆粒狀為陽性;TUNEL法測定凋亡情況(羅氏公司TUNEL試劑盒),具體步驟按說明進行,細胞核呈棕黃色為陽性。
結(jié)果:
與對照組相比,模型組、熊果酸10mg組、熊果酸20mg組的增殖
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