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文檔簡介
1、目的:研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)移植對實(shí)驗(yàn)性肺氣腫大鼠的影響,為臨床治療慢性阻塞性肺疾病尋求新的治療途徑提供科學(xué)依據(jù)。
方法:(1)選用wistar雄性大鼠42只,利用隨機(jī)數(shù)字表法分為7組空白對照組、模型1w組、模型2w組、模型4W組、MSCs移植1w組、MSCs移植2w組、MSCs移植4w組,共7組;每組各3只。
(2)第1-90天,每天兩次將實(shí)驗(yàn)大鼠置入熏煙染毒箱內(nèi),使用大前門牌香煙進(jìn)行熏煙處理,每
2、次40min,兩次熏煙時(shí)間間隔8h;每連續(xù)熏煙6天休息1天,為期90天.
(3)取6周齡Wistar雄鼠1只,采用貼壁選擇法分離、培養(yǎng)并擴(kuò)增大鼠MSCs,試驗(yàn)前臺盼藍(lán)染色觀察細(xì)胞活力.
(4)煙熏90天后統(tǒng)一處死全部大鼠,分離肺組織,生理鹽水沖洗肺腔后多聚甲醛固定,取右肺中下葉常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,應(yīng)用顯微-微機(jī)圖像處理系統(tǒng),每張切片選擇2個(gè)視野(×200),分別測量平均肺泡數(shù)(MAN)和肺泡腔與肺總
3、面積比(PAA)
(5)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析研究采用SPSS13.0處理數(shù)據(jù),7組間MAN及PAA的比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSDt檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
結(jié)果:(1).模型對照組和移植組均出現(xiàn)肺氣腫病理改變.
(2).模型對照組大鼠活動(dòng)減少、皮毛晦暗、體型瘦小、呼吸頻率快、靜息時(shí)有喘息、精神萎靡;移植組大鼠整體狀況明顯優(yōu)于模型對照組.
(3).模型對照組肺臟體積明顯增大,
4、彈性較差,呈蒼白色,經(jīng)指壓后可留有壓痕,肺臟切面可見多量較大的肺泡腔,呈現(xiàn)不規(guī)則的形狀,且大小不一.移植組肺臟病變較模型組輕.
(4).移植組與模型對照組比較:肺泡數(shù)目增多,肺泡面積減小,肺泡間隔增厚。MAN和PAA比較P>0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:(1)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植后的大鼠在整體情況、肺臟的大體標(biāo)本及病理切片的觀察、病理形態(tài)學(xué)指標(biāo)(MAN、PAA)方面均有所改善,說明MSC移植后對肺氣腫有所改
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