熊果酸誘導(dǎo)肝癌H22細(xì)胞凋亡的動物實驗研究.pdf

1、目的：探討三萜類中藥成分熊果酸(UA)對小鼠移植性肝癌(H22)細(xì)胞體內(nèi)生長的抑制作用。以18F-FLT為示蹤劑，通過18F-FLT PET/CT顯像評價UA的療效；分析UA作用后小鼠肝癌H22細(xì)胞的凋亡及Caspase-3、Caspase-8蛋白表達(dá)的變化，從而探討其誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的分子機制，為UA的開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法：建立昆明小鼠}t22肝癌移植腫瘤模型，右腋皮下接種小鼠肝癌H22細(xì)胞，實驗分為2組，包括UA處理組和對照組

2、。模型建立第三天UA組給藥2.268mg/kg/只/每天[半數(shù)致死量(LD50)22.68 mg/kg的1/10劑量]，對照組給予生理鹽水，均以灌胃方式給藥，10天后經(jīng)尾靜脈注入18F-FLT，測量F18-FLT的生物分布并行PET/CT顯像。然后處死小鼠，剝?nèi)∧[瘤組織，稱重，計算抑瘤率，采用HE染色法檢測形態(tài)學(xué)改變，流式細(xì)胞儀技術(shù)(FCM)檢測細(xì)胞凋亡并進(jìn)行周期分析，Western blot法檢測凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Cas

3、pase-8的表達(dá)。結(jié)果：(1)UA組18F-FLTPET/CT、顯像腫瘤部位有放射性攝取，對照組的SLV值(2.25±0.39)明顯高于UA組(1.26±0.19)(P<0.05)；UA對小鼠肝癌具有顯著的抑制作用，抑瘤率為52.8％，且與對照組比較，HE染色顯示在UA組出現(xiàn)較多凋亡細(xì)胞；(2)流式細(xì)胞術(shù)顯示UA的作用使肝癌細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期；(3)流式細(xì)胞術(shù)分析顯示UA組凋亡細(xì)胞增多，凋亡率達(dá)到(3.23±1.45)％；We