S100A9在口腔腫瘤生長(zhǎng)與增殖中的調(diào)控作用.pdf

1、目的：研究S100A9在涎腺腫瘤及正常涎腺組織中的表達(dá)水平，并分析S100A9對(duì)SCC-3細(xì)胞的增殖和遷移的影響，了解S100A9在口腔腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能所起的作用，可能為口腔腫瘤的早期臨床診斷及預(yù)后評(píng)估提供新方法。
　　方法：通過(guò)收集15例涎腺腫瘤手術(shù)的良性腫瘤標(biāo)本（多形性腺瘤）及瘤旁正常組織標(biāo)本，抽提出收集標(biāo)本組織的總 RNA，逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA，再采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的技術(shù)方法檢測(cè)出腫瘤及正常組織中S100A9 mR

2、NA的表達(dá)水平。采用RNA干擾技術(shù)，構(gòu)建出S100A9 shRNA，沉默和過(guò)表達(dá)S100A9，利用大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH5α進(jìn)行了轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，使用293T細(xì)胞來(lái)包裝慢病毒，再使慢病毒載體感染SCC-3細(xì)胞。應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)S100A9沉默組和S100A9過(guò)表達(dá)組分別與對(duì)照組相比對(duì)SCC-3細(xì)胞遷移的影響。應(yīng)用噻唑藍(lán)MTT比色實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)S100A9沉默組和 S100A9過(guò)表達(dá)組分別與對(duì)照組相比對(duì) SCC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)活力和增殖能力的影

3、響。
　　結(jié)果：1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示：與正常組織相比，15組腫瘤樣本中，有10組腫瘤組織中S100A9 mRNA高表達(dá)，5組腫瘤組織中的S100A9 mRNA為低表達(dá)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，p<0.05，15組腫瘤組織中S100A9 mRNA表達(dá)水平與正常組有顯著差異，且為高表達(dá)。
　　2.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示：在劃痕后24h，S100A9過(guò)表達(dá)組的SCC-3細(xì)胞遷移速度明顯高于對(duì)照組，S100A9沉默組的SCC-

4、3細(xì)胞的遷移速度與對(duì)照組相比，細(xì)胞的遷移速度明顯低于對(duì)照組細(xì)胞的遷移速度。
　　3.噻唑藍(lán)MTT比色實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示：在0h，12h，24h，48h，S100A9過(guò)表達(dá)組中相對(duì)SCC-3細(xì)胞數(shù)目均高于對(duì)照組，而S100A9沉默組的相對(duì)SCC-3細(xì)胞數(shù)目明顯低于同一時(shí)間下的對(duì)照組的細(xì)胞數(shù)目。
　　結(jié)論：1. S100A9在涎腺腫瘤中的表達(dá)量明顯高于正常涎腺組織，兩組間有明顯差異，說(shuō)明S100A9可能與口腔腫瘤的發(fā)生有關(guān)。