核糖體展示Anticalin模擬抗體庫篩選抗氨芐青霉素模擬抗體.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、分類號:密級:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文核糖體展示Anticalin模擬抗體庫篩選抗氨節(jié)青霉素模擬抗體ConstruetionofAntiealinLibraryandSereeningAntiamPieillinMimieAntibodyby形bosomeDisPlay研究生:李曉芳指導(dǎo)教師:高志賢教授專業(yè)..獲得學(xué)位名稱:微生物學(xué)理學(xué)碩士研究方向:獲得學(xué)位時(shí)間:食品安全2009年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)學(xué)院二00九年六月華中農(nóng)業(yè)

2、大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文第二章BBP的合成與高效表達(dá),.…,,..…,……,…二..............……,................................……。.121.前言.。,..…,.…,…,,.‘,.……“二,.……,……。.二,.,.…,......……,.‘…、‘..…、二‘.‘.、.…:…、.…‘.…,……,.、二‘..…122、材料與方法...........……,…,....……,......

3、....……,,..…,.…,、....................……,......……,..…,.,..…122,1材料.......……,......……,…,.,…,.......……,,.…。.……,…,……,..……,。.,…。..……,............……122.LI質(zhì)粒與菌株..…,.........……。..…,...........................……,.....……,......……,.

4、......……122.1.2主要試劑.....……,..……,…,..............................……,............……。二,...…。...……?!?22.1,3主要儀器設(shè)備.‘.,、二、.…‘.…,……,..…‘.……、,.,...........................……,.……,.…~……132.2方法,...........……,.,..…,......……,........

5、...……卜..、…,…,.............................................……132.2.IBBP序列的優(yōu)化設(shè)計(jì)與引物合成…,..................................……,........’....……132.2.2BBP基因的PCR合成.…、.…,、.…,.…,.‘二,二、..……。................……,.……。........……142.22,1B

6、BP基因的分段物合成…,.,.…,…,二,.。................……,......................……巧2.2.2.2BBP基因的1一8弓物合成.,..…、.,...……_....……,........……,.....……,、...……162.2.2.3BBP基因全長的合成......……,.…,.‘..........……,二,二‘.…、二,.‘..…。.,二甲..…、.…,162.2.3DH5a感受態(tài)細(xì)

7、胞二,..............……,.……,…,,......……,…”二..…、.…,....……‘.....……172.2.4BBP克隆重組載體的構(gòu)建與鑒定.....……,“.……,.,.............……、,............……172.2.5重組表達(dá)質(zhì)粒pET32a一BBP的構(gòu)建與誘導(dǎo)表達(dá).…‘..…,‘..…‘…,..........……,182.2.5.1pE下32一BBP表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建二,.…”…”.…

8、,.…,..…,二,…,~.‘二”.…,.。...一182.2.5.2pE下犯a一BBP的誘導(dǎo)表達(dá)...........……,............................................……182.2.6重組表達(dá)質(zhì)粒PBV220一BBP的構(gòu)建與誘導(dǎo)表達(dá)..……,..……,…,..…,一,二192.2.6.1表達(dá)質(zhì)粒pBV220一BBP的構(gòu)建二,…,.…,.,.,二,..…,……,…卜.,...........

9、..……192.2.6.2PBV220一BBP的誘導(dǎo)表達(dá)...................……,...................................……202.2.7BBP的變復(fù)性..........……~........……,...................……、.…,......……,............……202.2.8BBP的純化..…,,…,,.…,二。二、.…。...……,.,二,.,.…,.

10、.…,二,.…,……,.,…‘................……212.2.8.1Ni柱再生:.……,.,…‘......……~.....……~...........................................……,212.2.8.2Ni柱純化..……,.,二,..……,..…,..…、、..…,.,二,~.......……,……,…。,.…,…,二,,.…,…212.2.9BBP的W七sternblot檢測...

11、............................................................……,,..…213.結(jié)果與分析.…,.....……,二,二‘、.二一,,、二,.……、...……,......……、...................……‘............……,二223.1合成序列的PCR結(jié)果............................................……。.

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