2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文植酸酶基因在pIAβ8和pGAPZαA兩種載體中的表達(dá)及酶學(xué)特性分析姓名：馮華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師：尹清強(qiáng)20080601河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文SummeryOurobjectivesweretodeterminethebiochemicalcharactersofphytasefromAficuum，tOcomparetheabilityofphytasegeneexpression

2、inEcolibypIAp8andpGAPZoAvectors，andtochoosetheoptimumvectorforfurtherresearchesAficuumwasincubatedwithsolidmediumPhytaseWaSextractedandpurifiedbysaltingoutprocess，dialysis，laminaranalysisThepurifiedphytasewasusedfortherm

3、ostabilityandpHdeterminationTheoptimumpHpointsofphytasewere25and55andoptimumtemperatureWas50℃ItiseffectivetOhydrolyzephytatewhenthiskindofphytaseWasusedinanimalfeedThegenomicDNAfromA∥cuumhasbeenextractedsuccessfullyA14Kb

4、phytasegenewasamplifiedbyPCRThenthePUCmTvectorand14KbDNAwereligatedPCRdetectionanddigestionwithrestrictionendonucleasesofXbaIand劬1wereusedtOchecktheinsertedDNAThenucleotidesequenceofphytasegeneWasanalyzed，andithasbeendep

5、ositedintheGenBanknucleotidesequencedatabase(RefiEF206311)Thehomologiesofthegenenucleotidesequencesanddeducedaminosequencesbetweentheamplifiedgeneproductsandthetargetsequenceofphytasewere995％and996％respectively(ReKAY0133

6、15)ThededucedaminoacidsequenceshaveconservedthesequenceintheactivesiteofphytaseTherecombinantPUCm—TvectorswerepartiallydigestedwithXbaIand碭刀It0isolatephytasegeneandthenpurifiedwiththekitsasaboveTheplasmids@IA98andpGAPZtt

7、A)werealsopartiallydigestedwithXbaIand碭刀Iandpurifiedwiththekits，respectivelyLigasewasusedtOconstructtherecombinantofplAl＆8phyAandpGAPZctAphyAvectorsTherecombinantshufflevectorswereinsertedintoEcolibychemicalmethodBytheco

8、mparisonoftheexpressedphytaseactivitybetweenpGAPZaA—phyAandplAp8一phyAinthesupematantofcultureandthecells，itcouldbeconcludedthattherecombinantofplAl38一phyAcouldsecreteintracellularphytase(904U／ml，P005)，whilepGAPZaAphyAcou

9、ldsecreteextracellularphytase(804U／ml，P005)ThemolecularweightoftheexPressedphytaseinthisstudywas5461KDascretedinEcoliIthadthesamemolecularmass弱thatofthecommercialphytase硒determinedbySDSPAGEKeywords：Phytase；geneexpression

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