蛋白激酶Mst1調控抗病毒宿主防御的功能與機制研究.pdf

1、模式識別受體(PPRs)起始的天然免疫應答是機體宿主防御的重要組成部分。病毒入侵細胞后，視黃酸誘導蛋白樣受體(RLR)激活的抗病毒免疫應答負責防御RNA病毒及部分DNA病毒，而cGAS等DNA感知蛋白激活的STING信號通路則是細胞識別和抵御DNA病毒的主要機制。宿主細胞通過這些核酸識別受體，激活關鍵蛋白激酶TBK1/IKKε和轉錄因子IRF3，以及NF-κ B通路，誘導生成Ⅰ型和Ⅲ型干擾素，以及數(shù)以百計的細胞因子、促炎因子和抗病毒產物

2、。這些基因產物通過干預病毒防御、改變細胞代謝、促進組織修復、調控抗病毒通路、以及降解病毒RNA等方式直接清除和控制入侵的病毒病原體。干擾素調節(jié)因子3(IRF3)是抗病毒天然免疫應答中關鍵的信號中介蛋白和轉錄因子，但之前對于IRF3激活狀態(tài)的調控還知之甚少。
　　我們通過蛋白功能組學分析，發(fā)現(xiàn)蛋白激酶Mst1，而非其同源的Mst2，強烈抑制細胞質核酸檢識別通路。分子機制研究表明，Mst1直接結合并磷酸化IRF3，主要修飾位點在第75

3、位和253位蘇氨酸，致使IRF3分別喪失轉錄因子的DNA結合能力和形成同源二聚體的能力。此外我們也發(fā)現(xiàn)，Mst1能減弱病毒誘導的TBK1激酶的活化，從而進一步抑制IRF3的功能。因此，同源重組或CRISPR介導的Mst1基因敲除能顯著增強細胞與小鼠的抗病毒應答和防御。相反，Mst1的異源表達則強烈抑制細胞和斑馬魚模型動物的抗病毒防御。綜上所述，我們鑒定發(fā)現(xiàn)Mst1是天然抗病毒免疫的負調控因子，闡明了其作用的分子機制，并在細胞、小鼠和斑馬