半枝蓮注射液對人工感染鴨病毒性肝炎防治及機理探討.pdf

1、半枝蓮注射液是由半枝蓮、半邊蓮提取物等組成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解毒、消腫止痛等作用，在人醫(yī)臨床上常用于治療肝膽濕熱、小便黃赤、急慢性肝炎等病癥。獸用化學(xué)合成抗病毒藥的全面禁用，使得抗病毒中藥的開發(fā)成為必然趨勢，鴨病毒性肝炎是鴨肝炎病毒引起的一種急性、烈性傳染病，可以對養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大的損失，按照中醫(yī)理論辨證，鴨肝炎與肝炎都是內(nèi)因脾胃有熱，外因外感濕熱疫毒引起的肝經(jīng)實熱和濕熱泄瀉證，半枝蓮注射液在人醫(yī)臨床上常用于肝炎的治療，所以，將半枝

2、蓮注射液用于鴨病毒性肝炎的防治具有理論依據(jù)和實際意義。
　　 本課題中我們將通過改良后準備運用于獸醫(yī)臨床中的半枝蓮注射液安全性進行驗證，再對3日齡未免疫的健康雛鴨人工感染鴨病毒性肝炎，研究半枝蓮注射液對鴨病毒性肝炎的防治效果以及及免疫增強作用，然后觀察半枝蓮注射液多方面的藥效與抗炎機理及其與防治鴨病毒性肝炎的關(guān)系。
　　 第一，通過半數(shù)致死量的預(yù)試，小鼠腹腔注射最高濃度最大允許容積半枝蓮注射液未出現(xiàn)死亡，未測出LD50，

3、通過最大耐受最試驗得到了半枝蓮注射液的最大耐受量為MTD>2.5g/kg，大于臨床用量(0.02g/kg)100倍以上；通過微核細胞試驗得到半枝蓮注射液無致突變性的結(jié)果；通過對進行亞急性毒性試驗的小鼠的組織器官進行切片、鏡檢觀察無明顯的病理變化，說明小鼠較長時間內(nèi)使用半枝蓮注射液無明顯毒性。結(jié)果表明，半枝蓮注射液的毒副作用小，在臨床劑量下是安全的。
　　 第二，對3日齡健康雛鴨人工感染鴨病毒性肝炎后注射半枝蓮注射液，觀察其對鴨病

4、毒性肝炎的防治情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，藥物對動物的保護率與免疫組相當，高于模型組，說明半枝蓮注射液對人工感染鴨病毒性肝炎有較好治療作用。通過對小鼠注射半枝蓮注射液后對T、B淋巴細胞計數(shù)分類及白細胞分類計數(shù)、巨噬細胞的吞噬作用的影響的測定，表明半枝蓮注射液具有增強機體免疫功能的作用。推測這是其對鴨病毒性肝炎有一定防治作用的原因之一。
　　 第三，體外抑菌試驗結(jié)果表明半枝蓮注射液對多種致病菌均有較好的抑制作用。通過半枝蓮注射液對家兔內(nèi)毒素性

5、發(fā)熱的解熱試驗，得到不同濃度的半枝蓮注射液均有抗內(nèi)毒素引起的發(fā)熱并降低內(nèi)毒素水平作用的結(jié)果，但其確切機制有待進一步研究。通過建立大鼠蛋清足跖腫脹模型、小鼠二甲苯耳廓腫脹模型和瓊脂肉芽組織增生模型來評價半枝蓮注射液對急慢性炎癥的影響。在二甲苯致小鼠耳廓腫脹試驗中，不同濃度的半枝蓮注射液對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有一定的抑制作用，5％劑量組效果最好，抑制率達58.07％，2.5％劑量組和1.25％劑量組依次次之。2％水楊酸鈉組腫脹抑制率為1

6、2.68％，抗炎效果介于2.5％劑量組和1.25％劑量組之間；在蛋清致大鼠足跖腫脹試驗中，不同濃度的半枝蓮注射液對蛋清致大鼠足跖腫脹的抑制作用呈濃度梯度關(guān)系，5％劑量組的抗炎作用最強，2.5％劑量組次之，1.25％劑量組最弱。2.5％的半枝蓮注射液和2％水楊酸鈉溶液的抗炎作用相近；在瓊脂肉芽組織增生模型試驗中5％劑量組和2.5％劑量組對瓊脂引起的小鼠肉芽組織增生有一定抑制效果，腫脹抑制率分別為14.14％、10.07％，1.25％劑量組

7、組抗炎效果較差僅為1.66％，2％水楊酸鈉組抑制率為18.40％，抗炎效果好于三個半枝蓮劑量組。結(jié)果表明，半枝蓮注射液對急性、慢性炎癥以及炎癥發(fā)展的增生期都有較明顯抑制作用，且不同濃度的半枝蓮注射液的抗炎作用呈濃度梯度關(guān)系。通過測定人工感染鴨病毒性肝炎的雛鴨血清中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量，其中模型組血清中MDA含量為23.78nmol/mL，5％半枝蓮注射液組MDA含量為15.33nmol/mL，5％半枝蓮注射液組MDA含

8、量明顯低于模型組；模型組NO含量為128.21nmol/mL，5％半枝蓮注射液組NO含量為40.12nmol/mL，5％半枝蓮注射液組NO含量明顯低于模型組，表明半枝蓮注射液可能是通過降低MDA含量，減少NO生成，發(fā)揮抗炎作用。
　　 綜上所述，半枝蓮注射液對鴨病毒性肝炎有一定的防治作用，這與半枝蓮注射液具有抑制鴨肝炎病毒、增強機體免疫功能以及通過抗菌、解熱、抗炎作用預(yù)防繼發(fā)感染，控制病情惡化有著重要聯(lián)系。其中，通過減少炎癥介質(zhì)