2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分:烏司他丁對TNF-α作用下EA.hy926細(xì)胞通透性的影響及相關(guān)機制的研究
  目的:
  探討烏司他?。║TI)對腫瘤壞死因子-α(TNF-α)所致血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加的影響及其主要的分子機制。
  方法:
  以TNF-α干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926,建立炎癥刺激的細(xì)胞模型,用 UTI干預(yù) EA.hy926細(xì)胞,構(gòu)建RhoA過表達慢病毒,采用Transwell法、TEER法檢測細(xì)胞通透性

2、;免疫熒光法測肌球蛋白磷酸酶結(jié)合亞基1(p-MYPT1)的表達及細(xì)胞纖維肌動蛋白(F-actin)形態(tài)及分布;分別采用免疫細(xì)胞化學(xué)法、Western Blot法及qRT-PCR法檢測與通透性相關(guān)的關(guān)鍵分子RhoA、Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶Ⅱ(ROCK2)、MYPT1、p-MYPT1及內(nèi)皮血管鈣黏蛋白(VE-cadherin)表達的變化情況。
  結(jié)果:
  1.TNF-α作用下EA.hy926單層細(xì)胞電阻值明顯降低,細(xì)胞

3、通透性顯著升高(P<0.05),細(xì)胞內(nèi) p-MYPT1的表達量較正常組明顯增加,F(xiàn)-actin細(xì)胞骨架明顯重新分布,細(xì)胞內(nèi)應(yīng)力纖維增多,VE-cadherin的表達量明顯降低,而UTI可改善EA.hy926的上述變化情況;
  2.免疫細(xì)胞化學(xué)及Western Blot結(jié)果均顯示,與正常對照組比較,TNF-α使RhoA、ROCK2的表達明顯增加(均P<0.05),而UTI可抑制這兩種蛋白的高表達;
  3.與未轉(zhuǎn)染病毒細(xì)胞相

4、比,UTI和TNF-α作用下,RhoA過表達使細(xì)胞內(nèi)RhoA、ROCK2及p-MYPT1的表達顯著增高,VE-cadherin表達降低,細(xì)胞通透性增加(均P<0.05);而空載對照病毒對RhoA、ROCK2、p-MYPT1和VE-cadherin的表達以及細(xì)胞通透性無明顯影響(均P>0.05)。
  結(jié)論:
  UTI以劑量依賴性方式抑制TNF-α引起的EA.hy926細(xì)胞通透性增加,這一作用可能與Rho/ROCK信號通路有

5、關(guān)。
  第二部分:烏司他丁對脂多糖誘導(dǎo)膿毒癥小鼠肺損傷的保護作用及其可能機制
  目的:
  探討烏司他?。║TI)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)膿毒癥小鼠肺損傷的保護作用及其可能機制。
  方法:
  1.將C57BL/6小鼠隨機分為對照組(Con組,n=10)、模型組(LPS組,n=10)及UTI干預(yù)組(L+U組,n=30),建立LPS膿毒癥小鼠模型;
  2.采用肺組織肺濕干重比(W/D)法及伊文思藍(lán)

6、染色(Evans Blue,EB)法觀察各組小鼠肺組織含水量及肺微血管通透性的變化;
  3.HE染色法檢測各組小鼠肺組織病理變化;
  4.免疫組化法檢測肺組織VE-cadherin及ROCK2表達水平的變化。
  結(jié)果:
  1.與對照組比較,LPS組小鼠肺組織W/D及EB含量均顯著增加(均P<0.05),而UTI干預(yù)組W/D及EB含量明顯降低,其中UTI在104 U/kg、105 U/kg劑量時,與LPS組

7、相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(均P<0.05);
  2.與對照組小鼠肺組織相比,LPS組小鼠肺組織水腫,損傷嚴(yán)重,而UTI干預(yù)組肺組織損傷明顯減輕;
  3.免疫組化結(jié)果顯示,LPS組小鼠肺組織VE-cadherin的表達明顯降低,ROCK2的表達明顯增高(均P<0.05),而UTI干預(yù)后,VE-cadherin的表達顯著增加,ROCK2的表達顯著下降(均P<0.05)。
  結(jié)論:
  UTI以一定的劑量依賴性降低LP

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