大劑量?？颂婺崧?lián)合多西他賽對(duì)非小細(xì)胞肺癌EGFR野生型荷瘤小鼠治療效果的相關(guān)研究.pdf

1、背景與目的：肺癌是目前全球死亡率最高的腫瘤疾病，近年來，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。目前依據(jù)生物學(xué)行為的差異，通常大致分為兩類：非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC），占所有肺癌病例的80-85％左右；小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer， SCLC），占所有肺癌病例的15-20%左右。隨著基因時(shí)代的到來，肺癌相關(guān)的驅(qū)動(dòng)基因，如表皮生長因子受體（epidermal growt

2、h factor receptor，EGFR）、間變性淋巴瘤激酶（anaplasticlymphoma kinase，ALK）相繼被發(fā)現(xiàn)，靶向治療發(fā)展迅速，成為臨床應(yīng)用及研究的熱點(diǎn)。
　　近年多個(gè)隨機(jī)多中心的III期臨床試驗(yàn)比較了酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinase inhibitor，TKI）與常規(guī)化療的療效差異。數(shù)據(jù)表明，EGFR突變的NSCLC患者接受TKI作為一線治療的反應(yīng)率（response rate，RR）

3、和無進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS）明顯優(yōu)于接受化療的患者，盡管總生存期（overall survival，OS）在兩種治療方案之間并沒有顯著性的差異。然而，EGFR突變僅占一小部分。在白人人口EGFR突變占21%，在亞洲人口EGFR突變占40%。這意味著EGFR野生型的NSCLC肺癌仍占多數(shù)。NCCN指南指出，對(duì)于EGFR突變型的NSCLC患者一線應(yīng)用酪氨酸激酶抑制劑治療，而EGFR野生型的NS

4、CLC患者可采用化療。而傳統(tǒng)的化療的療效已達(dá)到平臺(tái)期，即，并不能夠改善大多數(shù)患者的遠(yuǎn)期治療結(jié)局。因而為EGFR野生型的NSCLC患者尋找新的有效的治療方案迫在眉睫。
　　本課題為通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探索大劑量埃克替尼聯(lián)合多西他賽的針對(duì)EGFR野生型腫瘤的療效及最佳給藥順序，通過選取種植有EGFR野生型A549腫瘤細(xì)胞株的荷瘤小鼠為研究對(duì)象，分別給予不同劑量?？颂婺嵋圆煌樞蚵?lián)合多西他賽，給藥結(jié)束后剝離腫瘤，檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白、微血管密度

5、情況觀察正常劑量與大劑量?？颂婺岵煌樞蚵?lián)合多西他賽的抗腫瘤效果，確定大劑量?？颂婺崤c多西他賽最佳用藥順序，為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。
　　方法：建立EGFR野生型A549腫瘤細(xì)胞株的荷瘤小鼠模型，并按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為5組，即對(duì)照組，單藥組（DTX、IcoH、IcoN），埃克替尼提前組（IcoH-DTX、IcoN-DTX），同時(shí)組（IcoH+DTX、IcoN+DTX）以及多西他賽提前組（DTX-IcoH、DTX-IcoN）。測量

6、腫瘤體積變化，繪制腫瘤生長曲線，計(jì)算抑瘤率；用western blot方法測定細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白含量。
　　結(jié)果：
　　1、體積變化和抑瘤率（1）單藥組大劑量?？颂婺嵋至雎蕛?yōu)于正常劑量埃克替尼（P<0.05），不及多西他賽組（P<0.05）；（2）不同用藥順序組中無論用藥順序如何，大劑量?？颂婺嵋至雎蕛?yōu)于正常劑量埃克替尼（P<0.05），正常劑量埃克替尼聯(lián)合多西他賽抑瘤率與多西他賽單藥組無顯著性差異（P>0.05）；（3）大劑

7、量?？颂婺崽崆敖M抑瘤率最優(yōu)（P<0.05）。
　　2、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白（1）多西他賽和不同劑量?？颂婺釋?duì)A459細(xì)胞非磷酸化的EGFR、AKT、MAPK表達(dá)無明顯影響；（2）?？颂婺峥梢种艵GFR、AKT、MAPK的磷酸化，大劑量明顯；而多西他賽對(duì)其無影響；（3）相比多西他賽單藥，多西他賽與?？颂婺崧?lián)合應(yīng)用AKT磷酸化無明顯變化，多西他賽誘導(dǎo)的EGFR及MAPK的磷酸化明顯被聯(lián)合應(yīng)用的?？颂婺嵋种疲髣┝棵黠@；（4）不同用藥順序中

8、，埃克替尼提前應(yīng)用組EGFR、AKT、MAPK表達(dá)及其磷酸化抑制相對(duì)明顯于同時(shí)組以及多西他賽提前組。
　　3、微血管密度（1）大劑量?？颂婺崤c多西他賽聯(lián)合應(yīng)用較其他實(shí)驗(yàn)組明顯降低（P<0.05），但大劑量?？颂婺嵩诙辔魉愔?、之后或者同時(shí)應(yīng)用組CD34表達(dá)無差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；（2）正常劑量?？颂婺崤c多西他賽聯(lián)合應(yīng)用較正常劑量?？颂婺釂嗡幗M明顯降低（P<0.05），但正常劑量埃克替尼在多西他賽之前、之后或者同時(shí)應(yīng)用