血管緊張素Ⅱ?qū)Χ喟桶纺芗?xì)胞凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)對(duì)多巴胺能細(xì)胞凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制。
  方法:體外培養(yǎng)CATH.a多巴胺能細(xì)胞,使用AngⅡ或/和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)抑制劑及AngⅡ受體阻滯劑處理細(xì)胞24 h。采用噻唑藍(lán)比色分析(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞活性;采用流式細(xì)胞儀和TUNEL試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;采用熒光

2、定量PCR檢測(cè)NADPH氧化酶亞基gp91 phox、p67phox的表達(dá);采用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)caspase-3剪切體及NADPH氧化酶亞基gp91phox、p67phox的水平;采用caspase-3活性檢測(cè)試劑盒、NADPH氧化酶活性檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)caspase-3及NADPH氧化酶的活性;采用流式細(xì)胞儀聯(lián)合相應(yīng)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactiveoxygen species,ROS)含量。
  結(jié)果:同對(duì)照組相比,

3、AngⅡ(10nM-100nM)可顯著促進(jìn)CATH.a細(xì)胞凋亡,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時(shí),相較于對(duì)照組,AngⅡ(10nM-100nM)可增加CATH.a多巴胺能細(xì)胞內(nèi)的NADPH氧化酶活性及ROS含量,其差異具有顯著性(P<0.05)。此外,上述AngⅡ的生物學(xué)效應(yīng)可被NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素(apocynin)及血管緊張素Ⅱ-1型受體(angiotensinⅡ type1 receptor,AT1R)拮抗劑氯

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