鞘內(nèi)注射Akt特異性抑制劑GSK690693抑制大鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)痛相關(guān)行為的研究.pdf

1、研究目的：
　　探討在大鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)癌癥疼痛的調(diào)控過程中Akt信號通路的作用
　　研究內(nèi)容：
　　1)Wistar大鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)癌癥疼痛模型的建立
　　2)探討在該模型的調(diào)控過程中Akt信號通路的作用
　　研究方法：
　　1.將體重180-200g Wistar大鼠隨機(jī)分為三組：正常對照組（Control組）、假手術(shù)組（Fake組）、接種Walker256乳腺癌細(xì)胞組（Model組）。Mo

2、del組為將含1×108個(gè)/ml Walker256大鼠乳腺癌細(xì)胞懸液20ul注入Wistar大鼠脛骨上段骨髓腔制備的骨癌癥疼痛模型。Fake組經(jīng)微量進(jìn)樣器注射等量的生理鹽水入骨髓腔；Control組則不進(jìn)行手術(shù)接種。分別于手術(shù)后數(shù)天（post-cancer cell implantation day，PID）PID0 d、7 d、14 d及21 d攝片檢查手術(shù)側(cè)脛骨，觀察體重及疼痛行為學(xué)變化，PID0 d、7 d及14 d行脛骨HE染

3、色，PID21 d取脊髓背角神經(jīng)節(jié)(DRG)行免疫印跡檢查磷酸化Akt(p-Akt)表達(dá)。
　　2.將成模Model組大鼠隨機(jī)分為三組：Model組、Model+GSK690693組及Model+Saline組，Model+GSK690693組分別于PID13 d、14 d及21 d時(shí)鞘內(nèi)注入Akt特異抑制劑GSK690693，Model+Saline組分別于PID13 d、14d及21d時(shí)鞘內(nèi)注入等量生理鹽水。分別于PID0 d

4、、7d、14 d及21d，觀察大鼠體重、痛相關(guān)行為學(xué)檢查，PID21 d取DRG行免疫印跡檢查p-Akt表達(dá)。
　　研究結(jié)果：
　　1.Model組PID7 d攝片檢查提示脛骨密度不均一，骨HE染色見大量腫瘤細(xì)胞浸潤、骨小梁破壞，PID14 d、PID21d Model組體重、機(jī)械縮足反應(yīng)閾值下降、自發(fā)性疼痛行為值、自由行走評分值上升，分別與Fake組、Control組比較均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），而Contro

5、l組與Fake組間比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。在PID21d，Model組DRG中p-Akt表達(dá)明顯高于Fake組與Control組，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。
　　2.在鞘內(nèi)注射Akt特異性抑制劑GSK690693后，Model+GSK690693組大鼠的體重、機(jī)械縮足反射閾值上升，自由行走痛行為評分值、自發(fā)性疼痛行為值及 DRG中p-Akt表達(dá)下降。PID14 d起Model+GSK690693組分別與Mod

6、el組、Model+Saline組間在自由行走痛行為評分值及自發(fā)性疼痛行為值的比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），機(jī)械縮足反射閾值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；PID21 d在體重、機(jī)械縮足反射閾值及DRG中p-Akt比較是顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　總結(jié)：
　　1.應(yīng)用腹水傳代培養(yǎng)Walker256大鼠乳腺癌細(xì)胞可以建立wistar大鼠脛骨癌癥疼痛模型。
　　2.Akt信號通路可能參與大鼠骨癌癥疼痛的