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1、目的:通過大鼠鞘內(nèi)注射免疫抑制劑甲氨蝶呤(MTX),研究其對(duì)慢性病理性疼痛的影響并探討可能的機(jī)制,為疼痛的治療提供新的途徑。 方法: 1.實(shí)驗(yàn)分組:SD大鼠32只,隨機(jī)分成4組。A組:n=5,假手術(shù)組+鹽水治療組;B組:n=9,根損傷+鹽水治療組;C組:n=9,根損傷+MTX預(yù)處理組;D組:n=9,根損傷+MTX治療組?! ?.建立慢性神經(jīng)痛模型:采用Bennet-Xie模型(1988)即坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型,它是目前公認(rèn)的與人類
2、慢性神經(jīng)痛表現(xiàn)最為近似的模型,簡(jiǎn)稱為CCI(chronicconstrictioninjury)模型?! ?.給藥途徑:經(jīng)大鼠L4,5間隙行蛛網(wǎng)膜下腔置管,分別于術(shù)后第3、5、7、9、11、13天通過放置的PE-10導(dǎo)管給藥。組A和組B給0.9%的生理鹽水(1∞μl/kg)。組C第3、5、7天給MTX,第9、11、13天給0.9%生理鹽水;組D第3、5、7天給0.9%生理鹽水,第9、11、13天給MTX。5mg每支的MTX粉劑,用0.
3、9%的生理鹽水稀釋為1000μ1,給量為0.5mg/kg?! ?.痛閾的行為學(xué)測(cè)定:采用熱輻射致痛測(cè)定大鼠痛閾的改變。分別于術(shù)前、術(shù)后第4、6、8、10、12、14天進(jìn)行。 5.免疫組化測(cè)定:術(shù)后第14天痛閾測(cè)定后,通過左心室灌注法行組織固定,取大鼠脊髓次日進(jìn)行免疫組化,測(cè)定脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP及TNF-α的表達(dá)?! 〗Y(jié)論: 免疫抑制劑MTX對(duì)慢性病理性疼痛存在預(yù)防及治療作用。其可能的機(jī)制是通過抑制激活的膠質(zhì)細(xì)胞所
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