1,2,3,4,6五[-O-(3,4,5-三羥基苯甲酰)]-a,β-D-葡萄糖類似物抑制腫瘤細(xì)胞生長作用的研究.pdf

1、腫瘤已經(jīng)成為當(dāng)今世界人類健康的一大難題，患腫瘤疾病的人數(shù)每年都在持續(xù)上漲，死亡率也在逐年上升。因此，抗腫瘤的研究越來越多的受到人們的關(guān)注。在這其中，找到合適的抗腫瘤藥物的候選化合物是治療腫瘤疾病的有效手段之一。鞣酸是植物中大量存在的一種多酚類鞣質(zhì)，在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，鞣酸具有抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種活性。1，2，3，4，6五[-O-（3，4，5-三羥基苯甲酰）]-α，β-D-葡萄糖(PGG)是一種重要的鞣質(zhì)，是鞣酸生物合成途徑中的重要

2、中間物。近年來的研究也發(fā)現(xiàn)PGG具有抗腫瘤活性，因此我們以PGG及其類似物作為研究對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行抗腫瘤作用的研究。
　　我們共合成了包括PGG在內(nèi)的33種鞣質(zhì)類化合物，并按照化合物的結(jié)構(gòu)特征將這些化合物分成9組依次在人結(jié)腸癌細(xì)胞（HCT116和HT29）、人肺癌細(xì)胞（A549和H1299）上進(jìn)行了活性的初步篩選。按照篩選結(jié)果，從中選擇了兩組活性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)特征明顯的化合物，以阿霉素作為陽性對(duì)照藥，對(duì)這兩組化合物在這四種腫瘤細(xì)胞上的半數(shù)

3、抑制率進(jìn)行了計(jì)算。從以上結(jié)果中我們可以得出，在PGG苯環(huán)上的取代對(duì)化合物的抗腫瘤活性有一定的影響，這其中的原因可能是因?yàn)樵诒江h(huán)上的羥基取代形成了高穩(wěn)定性的分子內(nèi)氫鍵。由此可知，PGG類化合物羥基的個(gè)數(shù)以及它們?cè)诒江h(huán)上的取代位置對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒活性有著至關(guān)重要的作用。根據(jù)IC50的結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)化合物PVG有著與PGG類似的抗腫瘤活性，且在人結(jié)腸癌細(xì)胞HT29和人肺癌細(xì)胞H1299上的細(xì)胞毒活性強(qiáng)于陽性對(duì)照藥阿霉素。因此，我們選擇PVG

4、作為這些化合物中的代表進(jìn)行了進(jìn)一步的抗腫瘤活性研究。
　　首先，我們對(duì)PVG在不同濃度和不同時(shí)間下對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116和人肺癌細(xì)胞A549的抑制生長作用進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PVG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116和人肺癌細(xì)胞A549有抑制作用，且有濃度依賴性和時(shí)間依賴性。按照實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們選擇了藥物作用時(shí)間為48小時(shí)作為下面實(shí)驗(yàn)的指標(biāo)。同時(shí)，我們探討了由PVG誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用是否與氧自由基(ROS)介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡作

5、用有關(guān)。因此，我們選擇了不同濃度的NAC單獨(dú)作用于腫瘤細(xì)胞、NAC與相同濃度的PVG共同作用于腫瘤細(xì)胞和PVG單獨(dú)作用于腫瘤細(xì)胞，得出的結(jié)果是化合物PVG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116和人肺癌細(xì)胞A549的生長抑制作用并不是通過氧自由基(ROS)途徑所進(jìn)行的。為了進(jìn)一步研究PVG的抗腫瘤生長作用機(jī)制，我們通過使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行了PVG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116和人肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞周期的研究，從結(jié)果可以看出，PVG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT11

6、6和人肺癌細(xì)胞A549具有明顯的周期阻滯作用，隨著PVG濃度的升高，阻滯在G2/M期的細(xì)胞數(shù)隨之升高，說明這兩種腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期均被PVG阻滯在G2/M期。另外，我們通過Western blotting檢測(cè)了PVG在人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116和人肺癌細(xì)胞A549上對(duì)凋亡相關(guān)蛋白PARP、Hsp90表達(dá)含量的影響，結(jié)果顯示PVG在HCT116和A549上作用48個(gè)小時(shí)后，能顯著增加PARP有活性的剪切片段的表達(dá)，以及降低熱休克蛋白Hsp9