（5-羥基-4-氧代-4H-苯并吡喃-3-基）-苯甲酰腙誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞周期停滯及凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討新型黃酮化合物(5-羥基-4-氧代-4H-苯并吡喃-3-基)-苯甲酰腙((5-hydroxy-4-oxo-4H-chromene-3-yl)-benzoyl-hydrazone，L1b)對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞周期調(diào)控及誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。 方法：不同濃度L1b處理HepG2細(xì)胞16、24、32、48小時(shí)后，用SRB法測(cè)定其對(duì)細(xì)胞增殖抑制作用，計(jì)算IC<,50>值；集落形成試驗(yàn)測(cè)定克隆形成率；相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的改變

2、；瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)L1b對(duì)HepG2細(xì)胞DNA的損傷作用；PI染色后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)L1b對(duì)HepG2細(xì)胞周期的影響；熒光顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察L1b誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡狀況；Western blot檢測(cè)L1b對(duì)胞內(nèi)MDM2、P53、P21蛋白的變化。 結(jié)果：L1b能抑制HepG2和L02細(xì)胞的增殖，且呈濃度依賴關(guān)系，24小時(shí)后對(duì)HepG2和L02兩種細(xì)胞的IC<,50>值分別為109.67μg/ml和90.38μg/

3、ml，但對(duì)兩種細(xì)胞抑制增殖作用差別不大；L1b能造成HepG2細(xì)胞克隆形成能力下降，最高濃度作用24小時(shí)后，HepG2細(xì)胞克隆形成率下降到到3.7﹪，與正常對(duì)照組比較差異顯著(p<0.01)；相差顯微鏡觀察L1b體外能使HepG2細(xì)胞收縮、失去固有形態(tài)；熒光顯微鏡和透射電鏡結(jié)果均顯示L1b能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡：流式細(xì)胞儀檢測(cè)出細(xì)胞周期停滯在G<,1>期和G<,2>期，G1期和G2期細(xì)胞百分含量分別由對(duì)照組的52﹪和0.3﹪上升到62