中藥排銅篩選方法的初步研究.pdf

1、銅是繼鐵和鋅之后人體里面最豐富的微量元素，在許多重要的生理過程中起著決定性的作用。例如:銅是機(jī)體很多酶的活性成分，是機(jī)體代謝的媒介;銅能夠影響鐵的代謝，間接地參與造血;銅還在骨骼與結(jié)締組織的形成以及血管的健康當(dāng)中扮演著重要角色。在機(jī)體內(nèi)，銅的含量須處于一種平衡的狀態(tài)，過多或過少，都會引發(fā)機(jī)體的一系列病變。當(dāng)機(jī)體處于銅缺乏狀況下，會造成組織的缺氧、內(nèi)分泌的失調(diào)、發(fā)育的遲緩以及免疫力低下等。反之，當(dāng)機(jī)體銅過載，同樣會誘發(fā)多種疾病，例如:老年

2、癡呆、威爾森病、帕金森氏癥、朊病毒疾病以及門克斯病等。其中，威爾森病(Wilson's disease，WD)又稱做肝豆?fàn)詈俗冃?Hepatolenticular degeneration，HLD)，是由常染色體中ATP7B基因突變引起銅代謝障礙的一種隱性遺傳病。因銅代謝受阻，從而導(dǎo)致銅在各器官上不斷聚集，尤其是肝、腦、角膜上的積累，造成器官組織損傷。倘若治療不及時且方式不當(dāng)，會致機(jī)體殘疾，更甚者，導(dǎo)致死亡。有些中藥復(fù)方對于HLD的療效

3、很好，但其治病機(jī)制與物質(zhì)基礎(chǔ)卻仍不明了。我們猜測可能是復(fù)方中某些中藥成分能夠與機(jī)體血液或者組織中的Cu2+形成絡(luò)合物，被排出體外，從而到達(dá)到治療效果。為了驗(yàn)證這個猜測，我們首先檢測中藥水煎液(Traditional Chinese medicine，TCM)中游離態(tài)Cu2+的量，然后另加一定量Cu2+，再測游離態(tài)Cu2+的量，計算Cu2+的加樣回收率。那么，加樣回收率就能夠指示中藥對Cu2+的絡(luò)合能力，且回收率與絡(luò)合能力顯示負(fù)相關(guān)。由此

4、建立一種中藥排銅的篩選方法，繼而探究中藥治療HLD的作用機(jī)制。
　　本文基于在pH為7.5的10mM Tris-HCl緩沖溶液中，Cu2+能催化螺環(huán)鄰香蘭素?zé)晒馑仉辏ㄌ结?，無色）開環(huán)顯色（橘紅色）的原理以測定中藥水煎液中游離態(tài)Cu2+。結(jié)果表明，Cu2+濃度在2-24μM范圍內(nèi)符合Beer-Lambert定律，R2=0.9990，檢測限為11.4nM，且探針1不受其他金屬離子共存的影響，能夠選擇性且特異性地對Cu2+產(chǎn)生顏色響應(yīng)