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1、雞新城疫是由新城疫病毒(NDV)引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病,具有很高的發(fā)病率和病死率,是危害養(yǎng)禽業(yè)的一種主要傳染病,給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的損失,OIE將其列為A類疫病。盡管疫苗接種是最普遍的預(yù)防措施,但是免疫雞群的感染給新城疫的防治帶來了嚴(yán)峻挑戰(zhàn),因此,免疫接種以外的抗病毒治療藥物研究也成為當(dāng)前應(yīng)用研究的熱點(diǎn),尤其是藥殘較低的抗病毒中藥倍受業(yè)界關(guān)注。近年來的研究表明許多中藥及其成分具有抗病毒活性,篩選具有抗NDV的中藥成分配伍
2、后選擇抗病毒作用更強(qiáng)的組方,對(duì)新城疫的防治具有重要意義,組方的抗病毒機(jī)制研究對(duì)于解釋中藥的抗病毒作用具有重要參考價(jià)值。
本研究應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)和MTT法對(duì)安全濃度范圍內(nèi)的黃芩苷、氧化苦參堿、三七總皂苷、黃連小檗堿、菊花總黃酮、綠原酸、板藍(lán)根多糖、黃芪多糖、板藍(lán)根生物堿和淫羊藿多糖10種中藥成分用細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行抗病毒篩選,以評(píng)價(jià)各中藥成分抵抗新城疫病毒感染的能力。結(jié)果表明,多數(shù)中藥成分均對(duì)病毒有抑制作用,其中黃芩苷、氧化苦參堿、三七
3、總皂苷、菊花總黃酮抑制作用較強(qiáng)。
為發(fā)揮中藥配伍作用篩選抗新城疫病毒作用較強(qiáng)的中藥組方,從篩選出的具有抗病毒作用的中藥成分三七總皂苷、菊花總黃酮、黃芩苷、氧化苦參堿、板藍(lán)根生物堿、黃芪多糖及板藍(lán)根多糖中,選取三種中藥成分按照一定比例組成中藥組方進(jìn)行抗病毒篩選。結(jié)果表明,組方1、5、6、7、9、10具有較好的抗病毒作用,并且不同的加藥方式及藥物濃度均對(duì)其抗病毒能力有一定的影響。
通過用細(xì)胞培養(yǎng)法篩選出具有較強(qiáng)抗新城疫病
4、毒的6個(gè)中藥組方,為進(jìn)一步驗(yàn)證其在體內(nèi)的抗病毒作用,應(yīng)用雞胚接種測(cè)定血凝價(jià)對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明各組方試驗(yàn)組的血凝價(jià)顯著低于病毒對(duì)照組,同時(shí)還與同濃度的單藥成分相比呈現(xiàn)差異顯著或極顯著,說明各中藥組方不僅有較好的抗病毒作用,而且比單藥成分效果更強(qiáng)。另外,加藥方式及組方濃度均對(duì)其抗病毒能力有一定的影響。
為進(jìn)一步研究中藥抗新城疫病毒的作用機(jī)制,采用MTT法和ELISA方法,測(cè)定篩選出的6個(gè)中藥組方對(duì)雞外周血淋巴細(xì)胞增殖及其IL-
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