固本健腦法對(duì)老年健忘大鼠海馬組織中RAGE-NF-κB信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的：
　　比較固本健腦法、補(bǔ)腎健腦法及補(bǔ)脾健腦法對(duì)老年健忘大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及海馬組織中RAGE/NF-κB信號(hào)通路的影響，綜合評(píng)價(jià)三者的療效差異，初步揭示固本健腦法改善老年健忘的部分分子機(jī)制。
　　方法：
　　SPF級(jí)健康雄性SD大鼠110只適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，用跳臺(tái)法篩選學(xué)習(xí)記憶能力相似者100只，隨機(jī)分為造模組85只、正常組15只，使用腹腔注射 NaNO2及 D-半乳糖（D-Gal）造模，1次/d，共40d。造模成

2、功大鼠共75只，將其隨機(jī)分成固本組、補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組、模型組，每組15只，固本組、補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組分別灌以固本健腦方、六味地黃丸、歸脾丸水煎液和石杉?jí)A甲混懸液，正常組和模型組則灌以等體積的0.9％NaCl溶液，1次/d，共20d。給藥結(jié)束后，用跳臺(tái)法及水迷宮法測(cè)試其學(xué)習(xí)記憶能力。行為學(xué)測(cè)試完畢后，取大鼠海馬組織，檢測(cè) AGEs的含量(免疫組化法)， RAGE、NF-κB p65的表達(dá)（Western Blot），Aβ1-42

3、、IL-1β、TNF-α的含量（ELISA）。
　　結(jié)果：
　　1、老年健忘動(dòng)物模型的建立與空白組比較，造模組大鼠毛發(fā)枯黃，唇爪暗紅粗糙，活動(dòng)遲緩，飲食精神差，呈明顯的衰老狀態(tài)；在跳臺(tái)法測(cè)試中，造模組動(dòng)物潛伏期縮短（P<0.05）、5min出錯(cuò)次數(shù)增多（P<0.05）；在水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)中，模型組潛伏期延長(zhǎng)（P<0.05）、游泳總路程增多(P<0.05)；在水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中，模型組經(jīng)過(guò)原平臺(tái)位置次數(shù)及在目標(biāo)象限停留時(shí)間

4、減少(P<0.05)、首次抵達(dá)目標(biāo)范圍的時(shí)間變長(zhǎng)(P<0.05)。
　　2、固本健腦法對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響與空白組比較，在跳臺(tái)法測(cè)試中，模型組大鼠潛伏期變縮短(P<0.05)，5 min出錯(cuò)次數(shù)增多（P<0.05），在水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)中，模型組潛伏期延長(zhǎng)(P<0.05)，游泳總路程增多(P<0.05)，在水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中，模型組經(jīng)過(guò)原平臺(tái)位置的次數(shù)及在目標(biāo)象限停留時(shí)間減少(P<0.05)，首次抵達(dá)目標(biāo)范圍時(shí)間變長(zhǎng)（P<0

5、.05）；各給藥組和空白組比較結(jié)果同上，與模型組比較則相反；補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組與固本組比較，結(jié)果與模型組、空白組二者相比較一致；補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組組間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3、模型組、補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)上調(diào)（P<0.05），固本組 AGEs的表達(dá)上調(diào)，Aβ1-42則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組比較，各給藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比

6、較，其余給藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。固本健腦法對(duì)大鼠海馬組織中 AGEs、Aβ1-42的影響與空白組比較，模型組、補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)上調(diào)（P<0.05），固本組 AGEs的表達(dá)上調(diào)，Aβ1-42則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組比較，各給藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比較，其余給

7、藥組AGEs、Aβ1-42的表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　4、固本健腦法對(duì)大鼠海馬組織中RAGE、NF-κBp65的影響與空白組比較，模型組及各給藥組RAGE、NF-κBp65的表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；與模型組比較，各給藥組RAGE、NF-κBp65的表達(dá)均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比較，其余給藥組RAGE、NF-κBp65的表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；

8、補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組組間比較，差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　5、固本健腦法對(duì)大鼠海馬組織中IL-1β、TNF-α的影響與空白組比較，模型組及各給藥組IL-1β、TNF-α的相對(duì)含量增多（P<0.05）。與模型組比較，各給藥組IL-1β、TNF-α的相對(duì)含量減少（P<0.05），與固本組比較，其余給藥組IL-1β、TNF-α的相對(duì)含量增多（P<0.05），補(bǔ)腎組、補(bǔ)脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.

9、05）。
　　結(jié)論：
　　1、造模結(jié)束后，造模組大鼠不僅處于明顯衰老的狀態(tài)，其學(xué)習(xí)記憶能力也大幅度下降，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)成功建立了老年健忘動(dòng)物模型。
　　2、固本健腦法、補(bǔ)腎健腦法、補(bǔ)脾健腦法均能在一定程度上改善老年健忘動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶功能，但固本健腦法的作用最佳。
　　3、老年健忘與AGEs、 Aβ1-42激活RAGE/ NF-κBp65信號(hào)通路，促使大量炎因子（IL-1β、TNF-α等）的表達(dá)和釋放，引起海馬腦區(qū)炎癥