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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
采用 SD大鼠創(chuàng)傷性顱腦損傷模型,探討針刺對(duì) TBI大鼠傷側(cè)皮層TLR2/4-NFκB信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用,以及TLR2/4-NFκB信號(hào)通路相關(guān)的炎癥細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α和顱腦損傷標(biāo)準(zhǔn)物S100B表達(dá)水平的影響,進(jìn)一步闡明針刺對(duì)創(chuàng)傷性顱腦損傷的調(diào)節(jié)機(jī)制,為針刺治療TBI提供可靠的臨床研究依據(jù),促進(jìn)針刺療法的推廣和應(yīng)用。
方法:
將108只雄性SD大鼠隨機(jī)均分為3組:正常組(不接受其他處理)
2、、模型組(造模完成后不接受針刺治療)、針刺組(造模完成后接受針刺治療)。各組大鼠再依據(jù)治療時(shí)間的不同,隨機(jī)等分為3天組、7天組、14天組三個(gè)亞組,每組12只。應(yīng)用Feeney’s自由落體硬膜外撞擊的方式建立TBI大鼠損傷模型,造模完成后給予針刺治療,應(yīng)用改良的mNss進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分。通過(guò)QPCR法檢測(cè)腦組織內(nèi)TLR2/4-NFκB信號(hào)通路基因TLR2、TLR4、NFκB及S100B的表達(dá)量,并采用Western blot法檢測(cè)TLR
3、2、TLR4、NFκB及S100B蛋白的表達(dá)量,酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)傷側(cè)皮層炎癥相關(guān)細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α的表達(dá)。
結(jié)果:
1. mNSS神經(jīng)評(píng)分結(jié)果顯示,針刺治療第7天開(kāi)始,針刺組較模型組有改善(P<0.05)。
2. TBI后模型組TLR2、TLR4、NFκB及S100B基因mRNA相對(duì)表達(dá)量均較正常高(P<0.05),且第7天表達(dá)量到達(dá)最高峰,第14天開(kāi)始下降。針刺治療第3天TLR2、TLR4基
4、因mRNA相對(duì)表達(dá)量較模型組高(P<0.05),而S100B基因mRNA相對(duì)表達(dá)量較模型組顯著下降(P<0.01)。針刺治療第7天開(kāi)始,TLR2、TLR4、NFκB基因mRNA相對(duì)表達(dá)量較模型顯著下調(diào)(P<0.01),治療第14天基本下降至正常水平;Western blot結(jié)果顯示 TLR2、TLR4、NFκB及S100B基因蛋白的表達(dá)水平與mRNA相比,表達(dá)趨勢(shì)基本相同。
3. ELISA結(jié)果顯示,IL-1β與TNF-α表達(dá)
5、趨勢(shì)基本相同。與正常相比,損傷后第3天模型組IL-1β與TNF-α表達(dá)量顯著上調(diào)(P<0.01)。針刺治療第3天,IL-1β與TNF-α表達(dá)量較模型組顯著下降(P<0.01),針刺治療第7天,針刺組IL-1β與TNF-α表達(dá)量基本降至正常水平,而模型組表達(dá)量仍高于正常水平(P<0.01)。
結(jié)論:
1.運(yùn)用成熟的Feeney’s自由落體硬腦膜外撞擊法可以建立損傷程度一致性較好的中度TBI損傷模型。
2.針刺
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