健脾疏肝抗毒方對(duì)三陰性乳腺癌異種移植瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、研究目的:
　　研究健脾疏肝抗毒方對(duì)三陰性乳腺癌荷瘤鼠抗腫瘤作用及其可能的機(jī)制。研究
　　方法:
　　應(yīng)用Fugene HD Transfection Reagent轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，經(jīng)G418篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231-pAcGFP)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光細(xì)胞百分率。采用皮下接種法建立MDA-MB-231-pAcGFP細(xì)胞異種移植瘤裸鼠，觀察移植瘤的生長(zhǎng)情況，熒光成

2、像技術(shù)觀察各臟器轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)目和大小。應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)不同空白組別:對(duì)照組（A組）、健脾疏肝抗毒方組(B組）、ADM3100（CXCR4抑制劑）組（C組）、健脾疏肝抗毒方聯(lián)合ADM3100組（D組）腫瘤微環(huán)境中的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞、腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)，蛋白印跡方法檢測(cè)各組腫瘤組織CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子的表達(dá)。
　　研究結(jié)果:
　　流式細(xì)胞儀檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染率高達(dá)96.5％，表達(dá)有綠色熒光蛋白的MDA-MB-2

3、31-pAcGFP細(xì)胞成瘤率為100％。對(duì)照組（A組）、健脾疏肝抗毒方組（B組）、CXCR4抑制劑組（C組）、健脾疏肝抗毒方聯(lián)合CXCR4抑制劑組(D組）。瘤體平均重量分別為:1.30±0.11g，0.75g±0.12g，0.48g±0.09g，0.44g±0.07g，瘤體平均體積分別為:6.635±0.5cm3，4.017±0.466cm3，2.664±0.7 cm3，2.323±0.492 cm3(P＜0.05)。三組的抑瘤率分別為

4、42.18％、62.95％、66.28％。A組、C組肝臟可見(jiàn)散在熒光轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，B組及D組肝臟未見(jiàn)有熒光結(jié)節(jié)。健脾疏肝抗毒方能顯著抑制腫瘤微環(huán)境中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞、腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的浸潤(rùn)，抑制CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子CXCR4、CXCL12、HIFα，NF-κB，VEGF的表達(dá)，且與ADM3100聯(lián)合后抑制作用顯著增強(qiáng)。
　　結(jié)論:
　　健脾疏肝抗毒方可以通過(guò)改變腫瘤微環(huán)境，調(diào)節(jié)CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子的