阿司匹林與miRNA-15b對乳腺癌裸鼠移植瘤生長的影響.pdf

1、目的:探討阿司匹林與miRNA-15b對人三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231裸鼠移植瘤生長（如增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移等）的影響。
　　方法:構(gòu)建過表達 miRNA-15b質(zhì)粒表達載體,采用體外細胞培養(yǎng)法培養(yǎng)MDA-MB-231,建立人三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231裸鼠皮下移植瘤模型，觀察miRNA-15b與阿司匹林單獨治療及聯(lián)合治療對移植瘤生長的影響，定期觀察測量腫瘤體積變化，記錄最終腫瘤體積、質(zhì)量及計算抑癌率，用Annex

2、in V-FITC/PI雙染法檢測各組乳腺癌組織細胞凋亡率，用熒光定量PCR法檢測各組乳腺癌組織miRNA-15b和EZH2 mRNA表達情況，用免疫組化方法檢測各組乳腺癌組織EZH2、PCNA和MVD表達情況。
　　結(jié)果:1.成功構(gòu)建重組的質(zhì)粒表達載體pcDNA6.2-miRNA-15。
　　2.所有裸鼠均在接種后5~8d內(nèi)成瘤，成瘤率100％，腫瘤隨時間的延長而增大,腫瘤生長曲線顯示：對照組相比，各治療組均能抑制裸鼠皮下

3、移植瘤的生長，尤其以聯(lián)合治療組抑制腫瘤生長的作用最為明顯。
　　3.最終體積與瘤重顯示：空白對照組與陰性對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；各治療組與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組與阿司匹林組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；聯(lián)合治療組與 miRNA-15b組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各組的抑瘤率分別為：阿司匹林組43.47%、miRNA-15b組60.38%、聯(lián)合

4、治療組72.13%。
　　4.各組移植瘤細胞凋亡率的結(jié)果顯示：空白對照組與陰性對照組移植瘤的早期凋亡率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；各治療組與對照組移植瘤的早期凋亡率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組與阿司匹林組移植瘤的早期凋亡率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；聯(lián)合治療組與miRNA-15b組移植瘤的早期凋亡率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組與陰性對照組、阿司

5、匹林組和聯(lián)合治療組移植瘤的晚期凋亡率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組和聯(lián)合治療組與其它處理組移植瘤的總凋亡率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　5.熒光定量PCR結(jié)果顯示：各處理組之間移植瘤EZH2 mRNA的表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；空白對照組、陰性對照組和阿司匹林組各組之間移植瘤miRNA-15b的表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；miRNA-15b組、聯(lián)合治療

6、組與其它處理組之間移植瘤 miRNA-15b的表達比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組與聯(lián)合治療組之間移植瘤miRNA-15b的表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)。
　　6.免疫組化結(jié)果：（1）EZH2結(jié)果：空白對照組、陰性對照組和阿司匹林組各組之間比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；miRNA-15b組、聯(lián)合治療組與其它處理組之間比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miRNA-15b組與聯(lián)

7、合治療組之間比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)。（2）PCNA和MVD結(jié)果：空白對照組與陰性對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)；各治療組與對照組移植瘤比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)； miRNA-15b組與阿司匹林組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；聯(lián)合治療組與miRNA-15b組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：1、在體內(nèi)，重組真核表達質(zhì)粒pcDNA6.2-miRNA-15b能降低乳