低溫和離心對小鼠卵母細胞紡錘體和發(fā)育潛能的影響.pdf

1、目的：研究低溫和離心對小鼠M II卵母細胞紡錘體構象，定位和發(fā)育潛力的影響。 方法：實驗一，M II期卵母細胞在室溫(24℃)或4℃環(huán)境下分別處理1、2、4和24h，并于37℃下恢復培養(yǎng)1和2 h，復溫或未經(jīng)復溫的卵孤雌激活后分析早期發(fā)育潛力，并對處理的卵通過免疫熒光細胞化學技術檢測紡錘體的損傷和重建動態(tài)。實驗二，小鼠MII期卵母細胞經(jīng)過1000，3000和5000rpm離心10min，通過免疫熒光細胞化學技術檢測紡錘體定位的變

2、化，并通過孤雌激活和體外受精分析離心處理的卵母細胞的早期發(fā)育潛力。 結果：紡錘體受低溫打擊的受損程度明顯依賴于處理溫度和時間，且低溫處理對紡錘體的損傷具有較強的可逆性，不論24或4℃，處理時間不超過4h的卵母細胞均能重建正常的紡錘體構像，但孤雌激活胚胎的早期發(fā)育潛力仍然受到明顯的影響，而24h低溫處理導致了紡錘體構像的不可逆破壞。對不同卵齡小鼠卵母細胞的研究發(fā)現(xiàn)卵齡大小不影響低溫打擊后的卵母細胞發(fā)育潛力。離心后的卵母細胞紡錘體具