GPR30對人類絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲性影響及其與子癇前期發(fā)病關(guān)系的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討GPR30在人類胎盤中的表達(dá)，研究其對人類絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲性的影響，及其與子癇前期發(fā)病的關(guān)系。
　　方法：應(yīng)用免疫組化檢測早孕期絨毛、正常產(chǎn)婦胎盤和重度子癇前期患者胎盤組織中GPR30的表達(dá)。以常氧和缺氧復(fù)氧環(huán)境分別模擬正常和子癇妊娠狀態(tài)，用17-β-雌二醇（17β-E2）、GPR30激動劑 G1和阻滯劑 G15預(yù)處理體外培養(yǎng)絨毛組織和人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR8/SVneo。顯微鏡下觀察體外絨毛組織滋養(yǎng)細(xì)胞生長侵襲范圍，

2、 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲能力。免疫熒光法檢測絨毛組織和 HTR8/SVneo細(xì)胞中 GPR30蛋白表達(dá)情況。Western blot法檢測HTR8/SVneo細(xì)胞中GPR30和MMP-9蛋白表達(dá)。RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞中GPR30、MMP9及MMP2 mRNA。
　　結(jié)果：（1）GPR30在早期絨毛組織和正常末期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞上都有表達(dá)，且早孕期的表達(dá)水平高于正常末期胎盤，但在重度子癇前期胎盤上

3、GPR30蛋白表達(dá)明顯減少；（2）E2及GPR30激動劑G1可增加滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力，阻滯劑 G15則可下調(diào)其侵襲性,H/R嚴(yán)重?fù)p害滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力；（3）E2、G1可誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞GPR30蛋白表達(dá)上調(diào)，而G15則下調(diào)其表達(dá)。H/R使GPR30蛋白明顯下調(diào)。（4）GPR30蛋白水平與侵襲相關(guān)蛋白MMP-9表達(dá)水平有相關(guān)性。（5）各實(shí)驗(yàn)組之間在GPR30、MMP9和MMP2的mRNA表達(dá)水平上未見明顯差異。
　　結(jié)論：GPR30參