Shp2的類泛素化修飾促進(jìn)肝癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文Shp2的類泛素化修飾促進(jìn)肝癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制姓名：姓名：鄧蓉學(xué)號：學(xué)號：0137109030導(dǎo)師：導(dǎo)師：余健秀研究員專業(yè)：專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)申請學(xué)位：申請學(xué)位：理學(xué)博士答辯日期：答辯日期：2016年4月資助基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金（81472571）上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2016年4月博士學(xué)位論文1Shp2的類泛素化修飾促進(jìn)肝癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制的類泛素化修飾促進(jìn)肝癌發(fā)生發(fā)展的分

2、子機(jī)制摘要摘要Shp2（Srchomology2containingphosphotyrosinephosphatase2）蛋白是由PTPN11基因編碼的一個(gè)廣泛表達(dá)的蛋白酪氨酸磷酸酶。它由N端兩個(gè)連續(xù)的SH2結(jié)構(gòu)域、磷酸酶活性的PTPase結(jié)構(gòu)域、以及C端的尾部序列組成。其作用廣泛，尤其在RasERK信號通路和腫瘤發(fā)生發(fā)展方面具有重要作用，近年來有文章報(bào)道Shp2蛋白與肝癌密切相關(guān)。SUMO（SmallUbiquitinrelated

3、Modifier）是泛素（Ubiquitin）類多肽鏈超家族的一個(gè)重要成員，是一種高度動態(tài)、可逆、保守的翻譯后修飾。SUMO修飾參與了轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、核轉(zhuǎn)運(yùn)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因組完整性維持等多項(xiàng)細(xì)胞內(nèi)活動，對多種靶蛋白的自身活性、細(xì)胞內(nèi)定位、蛋白穩(wěn)定性及蛋白質(zhì)之間相互作用等進(jìn)行調(diào)節(jié)，是一種重要的多功能的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式。越來越多的文章報(bào)道了SUMO修飾與肝癌的關(guān)系，SUMO1在肝癌臨床樣本中高表達(dá)，說明SUMO修飾參與了肝癌發(fā)生發(fā)展的調(diào)節(jié)過程

4、。通過臨床數(shù)據(jù)庫Oncomine分析，我們發(fā)現(xiàn)Shp2在肝癌中的表達(dá)水平并沒有顯著性差異，而SUMO修飾體系中的E1、E2酶都有顯著增加趨勢，提示SUMO修飾在肝癌中的重要性。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Shp2可以被SUMO1修飾，修飾位點(diǎn)為C端的第590位賴氨酸。SUMO修飾可以影響EGF誘導(dǎo)的RasERK信號的激活，當(dāng)SUMO修飾位點(diǎn)K590突變后，抑制了RasERK活性、軟瓊脂克隆形成和裸鼠體內(nèi)的成瘤能力。進(jìn)一步，我們發(fā)現(xiàn)Shp2的SUMO1修

5、飾通過促進(jìn)與骨架蛋白Gab1的結(jié)合，促進(jìn)RasERK的激活。此外，我們發(fā)現(xiàn)人源Shp2與鼠源Shp2的SUMO修飾水平存在差異，這種差異導(dǎo)致了ERK活性的差異，通過人為突變鼠源Shp2增強(qiáng)其SUMO1修飾水平后，可以恢復(fù)鼠源Shp2對ERK活性的調(diào)控能力。綜上所述，我們的研究結(jié)果表明Shp2的SUMO1修飾通過促進(jìn)其與Gab1的結(jié)合，從而加速肝癌細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤形成，提供了Shp2參與肝癌發(fā)生發(fā)展的新的調(diào)控機(jī)制。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：Sh