血小板衍生生長因子受體-β信號促進突變型p53介導MDA-MB-231阿霉素耐藥.pdf

1、乳腺癌，是世界女性最常見的惡性腫瘤之一。三陰性乳腺癌（triple-negative breast ancer，TNBC，ER-/PR-/HER2low）占乳腺癌發(fā)病率10％-20%，高度低分化與異質(zhì)性，進展快、轉(zhuǎn)移率高、治療反應(yīng)差、術(shù)后復(fù)發(fā)率高[1]，轉(zhuǎn)移、耐藥和復(fù)發(fā)彼此交互大大增加了患者的死亡率。許多促進上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial mesenchymal transition，EMT）的轉(zhuǎn)錄因子和干性相關(guān)基因都參與了腫瘤形成

2、、轉(zhuǎn)移以及化療耐藥[2-5]。然而，介導這些過程的潛在機制仍然不清。本論文報道：突變型p53（p53蛋白DNA結(jié)合區(qū)突變）作為腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和干性特征的共同促進者受到外源性血小板衍生生長因子受體-β（platelet-derived growth factor receptor-beta，PDGFR-β）信號正調(diào)控，從而誘導癌癥耐藥發(fā)生。
　　目的：探討血小板衍生生長因子受體-β信號與三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞阿霉素耐

3、藥的關(guān)系及機制。
　　方法：采用流式細胞術(shù)、MTS法檢測血小板衍生生長因子-DD（platelet-derived growth factor-DD，PDGF-DD，PDGFR-β特異性配體）對阿霉素所致的細胞G2期阻滯、細胞凋亡及死亡情況的影響；qPCR和WB檢測突變型p53、Cdk1、PDGFR-β、p21、Bax、熱休克蛋白90（heat shock protein90，Hsp90）及拓撲異構(gòu)酶（DNA）Ⅱ結(jié)合蛋白1[top

4、oisomerase(DNA)Ⅱ binding protein1，TopBP1]表達水平，以研究PDGF-DD、Wortmannin（PI3K抑制劑）對突變型p53及其功能的影響；利用siRNA干擾技術(shù)、qPCR探討突變型p53、PDGF-DD和耐藥相關(guān)基因表達的關(guān)系。
　　結(jié)果：PDGF-DD明顯提高阿霉素條件下細胞存活率、降低細胞凋亡率、一定程度改善細胞G2期阻滯，顯著提高突變型p53蛋白水平并改變其下游基因Cdk1、PDG

5、FR-β、p21、Bax表達，但突變型p53 mRNA變化不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。PDGF-DD顯著上調(diào)Hsp90（突變型p53蛋白穩(wěn)定因子）和TopBP1（突變型p53功能促進蛋白）mRNA和蛋白水平，Wortmannin處理后表達明顯下降。PDGF-DD明顯提高EMT和干性相關(guān)基因FOXC2、Twist、Snail、Nanog、Oct4 mRNA水平，P53 siRNA處理后mRNA表達顯著下降。
　　結(jié)論：PDGF-