扶正祛毒湯對(duì)AML-CR患者CD34+細(xì)胞源DC誘導(dǎo)過程中IL-12的影響.pdf

1、目的:通過扶正祛毒湯干預(yù)急性髓系白血病緩解期(AML-CR)患者CD34+細(xì)胞源樹突細(xì)胞(Dendritic Cells，DC)的誘導(dǎo)，觀察DC誘導(dǎo)成熟前后血清中白介素-12(Interleukin-12)的變化，并分析其與DC的關(guān)系，從而探究扶正祛毒湯誘導(dǎo)DC成熟的機(jī)理。
　　方法:分別以高、中、低劑量的扶正祛毒湯煎劑灌胃新西蘭大白兔，第三天后在無菌環(huán)境下進(jìn)行心臟取血，制備高、中、低三種不同濃度的含藥血清，采取納入實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)患者骨

2、髓，用人淋巴分離液提取單個(gè)核細(xì)胞，以免疫磁珠陽性選擇法提取CD34+細(xì)胞，使用Flt-3、IL-3、TPO、SCF細(xì)胞因子體外擴(kuò)增后，以高、中、低劑量扶正祛毒湯含藥血清聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)CD34+細(xì)胞為DC，收集第0、6、9天上清并觀察DC形態(tài)，ELISA法測(cè)IL-12含量，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC表面抗原表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.DC形態(tài):第0天鏡下為CD34+細(xì)胞形態(tài)，3天后見細(xì)胞逐漸聚集成簇，形成集落，細(xì)胞表面變得不規(guī)則

3、，并出現(xiàn)細(xì)毛狀模糊突起，6天后胞體變大，細(xì)胞膜可見形如樹權(quán)的突起，與其他樹突細(xì)胞交織，集落較前增多，第9天后可見形狀典型、成熟的DC。含藥血清+細(xì)胞因子組誘導(dǎo)的DC形態(tài)較空白血清+細(xì)胞因子組(KB+YZ)、細(xì)胞因子組（YZ)典型。
　　2.IL-12含量:在扶正祛毒湯聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)CD34+細(xì)胞成為DC的過程中，在同一時(shí)間段:各含藥血清+細(xì)胞因子組與KB+YZ、YZ組之間均有差異(P＜0.05)，其中扶正祛毒湯高劑量+細(xì)胞因子組

4、(FQG+YZ)與扶正祛毒湯中劑量+細(xì)胞因子組(FQZ+YZ)、扶正祛毒湯低劑量+細(xì)胞因子組(FQD+YZ)之間有顯著差異(P＜0.05)，F(xiàn)QZ+YZ組與FQD+YZ組之間無差異(P＞0.05)，KB+YZ組與YZ組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。IL-12的含量隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加，各組第9天與第6天之間比較有差異(P＜0.05)，第9天與第0天比較有差異(P＜0.05)，第6天、第0天之間相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

5、r>　　3.DC表面抗原表達(dá):CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR在各組均有表達(dá)。CD80在各組中的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);CD83的表達(dá)在含藥血清+YZ組與KB+YZ組、YZ組之間有顯著差異(P＜0.05)，KB+YZ組與YZ組之間無顯著差異(P＞0.05)，且在含藥血清+YZ組中，高劑量組與中、低劑量組之間有顯著差異(P＜0.05)，中、低劑量組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);CD86的表達(dá)在含藥血清+Y

6、Z組與KB+YZ組、YZ組之間有顯著差異(P＜0.05)，KB+YZ組與YZ組之間無顯著差異(P＞0.05)，中劑量組與高、低劑量組之間有顯著差異(P＜0.05);CD1a、HLA-DR的表達(dá)在含藥血清+YZ組與KB+YZ組、YZ組之間有顯著差異(P＜0.05)，KB+YZ組與YZ組之間無顯著差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.扶正祛毒湯聯(lián)合細(xì)胞因子能夠誘導(dǎo)CD34+細(xì)胞源DC的成熟。
　　2.扶正祛毒湯可誘導(dǎo)