骨髓CD34+細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化的體外研究.pdf

1、目的：探討從日本大耳白兔骨髓中分離CD34+細(xì)胞，并誘導(dǎo)、鑒定其分化為內(nèi)皮細(xì)胞的方法。
　　方法：采用Percoll分離液梯度離心繼以貼壁篩選法進(jìn)行篩選分離，內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)誘導(dǎo)分化從骨髓中分離、培養(yǎng)的CD34+細(xì)胞，分別通過倒置顯微鏡、免疫細(xì)胞化學(xué)進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果：對(duì)骨髓CD34+細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，可見細(xì)胞從第7天開始進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期，生長(zhǎng)旺盛，細(xì)胞呈“S”型生長(zhǎng)；CD34+細(xì)胞培養(yǎng)2周的細(xì)

2、胞覆蓋底部的瓶子，并達(dá)到高峰的增殖，細(xì)胞呈鵝卵石狀排列。凝血因子VIII，CD31免疫組化染色均為陽性；免疫熒光發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞呈現(xiàn)紅色熒光，提示細(xì)胞攝取Dil-AcLDL，證明CD34+細(xì)胞分化為有功能的內(nèi)皮細(xì)胞。
　　結(jié)論：
　?。?）用Percoll分離液梯度離心繼以貼壁篩選法可分離出較多的CD34+細(xì)胞。
　　（2）CD34+細(xì)胞培養(yǎng)、誘導(dǎo)2周細(xì)胞達(dá)增殖高峰。
　　（3）CD34+細(xì)胞能夠分化為有功能的血管內(nèi)