槲皮素對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)的小鼠B16黑素瘤細(xì)胞氧化損傷的干預(yù)作用.pdf

1、目的:
　　白癜風(fēng)是一種頑固性的色素脫失性皮膚病，可發(fā)生于任何性別、年齡及身體任何部位。該病在臨床上易診難治，且發(fā)病率高，本病雖無明顯的自覺癥狀，但卻影響患者的容貌，尤其是發(fā)生在顏面部的皮損，給患者精神上帶來巨大的壓力，影響其工作、學(xué)習(xí)和生活。目前白癜風(fēng)治療方式主要包括:外用糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑，自體表皮或黑色細(xì)胞移植，局部光療或光化學(xué)療法，中醫(yī)中藥等。但各種治療方式治療效果欠佳，起效較慢，還需要患者較好的依從性。此外，長期外用

2、激素類藥物有引起皮膚變薄、毛細(xì)血管擴(kuò)張，甚至萎縮，以及停藥易反復(fù)等副作用。而應(yīng)用局部光療亦可導(dǎo)致皮膚灼傷、老化，甚至誘發(fā)皮膚癌。因此，對(duì)于白癜風(fēng)治療的研究有很大的臨床價(jià)值。
　　白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制至今沒有一致的觀點(diǎn)，國內(nèi)外的研究證明本病與遺傳、自身免疫、氧化應(yīng)激、神經(jīng)等機(jī)制有關(guān)。近年來氧化應(yīng)激更是白癜風(fēng)發(fā)病機(jī)制的研究熱點(diǎn)，不斷有研究證實(shí)表皮黑素細(xì)胞存在氧化應(yīng)激水平不斷增高的現(xiàn)象，這可能是導(dǎo)致黑素細(xì)胞功能障礙，引起白癜風(fēng)發(fā)生的重要病因

3、[2]。研究發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)進(jìn)展期患者表皮中聚積大量過氧化氫(Hydrogenperoxide，H2O2)[3-5]。氧化應(yīng)激可引起黑素合成的減少及黑素細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)了白癜風(fēng)的發(fā)生、發(fā)展。
　　隨著對(duì)白癜風(fēng)發(fā)病機(jī)制研究的深入，針對(duì)氧化應(yīng)激的中藥在白癜風(fēng)治療中顯示了巨大潛力。槲皮素（3，3'，4'，5，7-五羥基黃酮）是多種中藥的有效成分，廣泛分布于多種植物的花、果實(shí)、葉中，如中藥槐米、銀杏葉、菟絲子、刺五加、滿山紅等，是一種具有多種生

4、物活性的黃酮類化合物，具有很高藥用價(jià)值。研究表明槲皮素具有抗氧化、清除體內(nèi)自由基、抗炎、抗菌、抗病毒、抗過敏、抗腫瘤及抗突變等多方面藥理作用，是近年來國內(nèi)外學(xué)者研究的熱門課題。
　　本研究從氧化應(yīng)激損傷的角度，以H2O2誘導(dǎo)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞氧化損傷為研究對(duì)象，通過觀察槲皮素對(duì)體外培養(yǎng)的B16細(xì)胞過氧化損傷狀態(tài)的影響，探討槲皮素對(duì)黑素細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，為其防治白癜風(fēng)的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
　　方法:
　　1

5、采用MTS法檢測(cè)經(jīng)不同濃度H2O2處理后小鼠B16黑素瘤細(xì)胞的增殖率，根據(jù)上述結(jié)果體外構(gòu)建B16黑素瘤細(xì)胞氧化應(yīng)激模型。
　　2采用MTS法檢測(cè)經(jīng)不同濃度槲皮素處理后小鼠B16黑素瘤細(xì)胞的增殖率。
　　3采用相關(guān)氧化應(yīng)激指標(biāo)測(cè)試試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD、MDA水平。
　　結(jié)果:
　　1小鼠B16黑素瘤細(xì)胞經(jīng)濃度為1mmol/lH2O2，處理0.5h后，黑素瘤細(xì)胞增殖率出現(xiàn)顯著下降(P＜0.01）。
　　2實(shí)驗(yàn)

6、1、2、3組分別經(jīng)25μmol/l、50μmol/l、100μmol/l槲皮素1640培養(yǎng)基處理24h后，再經(jīng)1mmol/lH2O2處理0.5h，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比實(shí)驗(yàn)1、2、3組黑素瘤細(xì)胞增殖率降低(P＜0.05），但均高于過氧化氫組(P＜0.05)。
　　3實(shí)驗(yàn)1、2、3組與對(duì)照組相比，黑素瘤細(xì)胞內(nèi)SOD活性顯著升高(P＜0.05）;但MDA活性顯著下降(P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1小鼠B16黑素瘤細(xì)胞增殖率