辛伐他汀對過氧化氫誘導(dǎo)的人成骨樣細(xì)胞(MG63細(xì)胞)凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討辛伐他汀對過氧化氫誘導(dǎo)的MG63細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　 方法：采用合適濃度過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)損傷MG63細(xì)胞,造成細(xì)胞凋亡模型;利用不同濃度辛伐他汀預(yù)處理細(xì)胞;根據(jù)不同處理方法將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分為5組:正常對照組,單純H2O2損傷組,高濃度辛伐他汀預(yù)處理組(10-7 mol/L),中濃度辛伐他汀預(yù)處理組(10-8 mol/L,),低濃度辛伐他汀預(yù)處理組(10-9 mol/L)。通過光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、MTS

2、法檢測細(xì)胞活性,觀察辛伐對過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用;通過Western Blot法檢測Caspase-9和bcl-2表達(dá)，觀察此種保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　 結(jié)果：
　　 1、光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)光鏡下發(fā)現(xiàn)正常細(xì)胞組無明顯細(xì)胞凋亡;單純H2O2損傷組凋亡細(xì)胞比例顯著增多,出現(xiàn)染色質(zhì)分離、染色體濃縮、胞體皺縮、不同濃度辛伐他汀預(yù)處理組(10-7～10-9mol/L辛伐他汀預(yù)處理后再予以500umol/L H2O2處理)

3、凋亡細(xì)胞比例隨著辛伐他汀濃度的增加而下降,提示辛伐他汀具有拮抗H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用,并且這一作用呈現(xiàn)劑量依賴性。
　　 2、MTS法觀察細(xì)胞活性與正常對照組比較,單純H2O2損傷組OD值顯著下降;不同濃度辛伐他汀處理組,OD值隨著辛伐他汀濃度升高而逐漸升高,提示實(shí)驗(yàn)所用濃度辛伐他汀具有保護(hù)細(xì)胞活性作用,作用強(qiáng)弱與濃度呈正相關(guān)。
　　 3、Westem Blot法檢測信號分子表達(dá)辛伐他汀抑制了H2O2誘導(dǎo)的MG63細(xì)