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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
血管和神經(jīng)系統(tǒng)雖然在功能上有所不同,但它們通常具有類似的功能維護(hù)機(jī)制以及相同的調(diào)控因子。神經(jīng)血管功能紊亂已成為一些血管性疾病和神經(jīng)性疾病的發(fā)病機(jī)制。本研究旨在闡明長(zhǎng)鏈非編碼RNA-MIAT(long non-codingRNA-MIAT)在眼部神經(jīng)血管功能異常進(jìn)程的調(diào)控作用及其機(jī)制。
方法:
我們首先通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)了MIAT在視網(wǎng)膜血管病變和神經(jīng)病變動(dòng)物模型以及視網(wǎng)膜血管細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞病變中
2、的表達(dá)規(guī)律,明確了眼部血管神經(jīng)病變與MIAT表達(dá)的相關(guān)性;在體水平,采用視網(wǎng)膜血管發(fā)育、角膜新生血管(CNV)以及糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)等動(dòng)物模型,通過(guò)視網(wǎng)膜平鋪片IB4染色、裂隙燈顯微鏡和免疫熒光染色等技術(shù),揭示了MIAT干預(yù)對(duì)眼部神經(jīng)血管功能異常的調(diào)控作用;離體水平,采用Hoechst染色、JC-1染色和PI/Calcein-AM染色等技術(shù),揭示了MIAT表達(dá)干預(yù)對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞活力、增殖、凋亡和細(xì)胞相互作用的影響;機(jī)制研究方面,采用
3、熒光素酶和qRT-PCR等實(shí)驗(yàn),揭示了MIAT調(diào)控Müller細(xì)胞功能的分子機(jī)制。
結(jié)果:
qRT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),MIAT在氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(OIR)、視神經(jīng)夾傷(ONT)以及糖尿病的動(dòng)物模型中表達(dá)異常;MIAT在Müller細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞以及神經(jīng)元的高氧或者低氧脅迫時(shí)表達(dá)異常,其中MIAT在Müller細(xì)胞脅迫時(shí)表達(dá)改變最為明顯。在體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),MIAT的表達(dá)沉默抑制了小鼠視網(wǎng)膜血管的發(fā)育,緩解了角膜堿燒傷
4、小鼠角膜新生血管的形成,減少了糖尿病小鼠視網(wǎng)膜的膠質(zhì)化以及RGC的存活。離體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),MIAT的表達(dá)沉默降低了Müller細(xì)胞和RGC的活性、線粒體膜電位以及增殖能力,促進(jìn)了凋亡;共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明,Müller細(xì)胞的MIAT表達(dá)改變間接地影響視網(wǎng)膜神經(jīng)元和內(nèi)皮細(xì)胞的功能;機(jī)制研究發(fā)現(xiàn),MIAT可通過(guò)MIAT/miR-150-5P/VEGF來(lái)調(diào)控Müller細(xì)胞的功能,從而調(diào)節(jié)眼部神經(jīng)血管間的相互作用。
結(jié)論:
本研究發(fā)
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