PDTC對LPS誘導(dǎo)小鼠ARDS肺組織凋亡因子表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：本課題以脂多糖（LPS）誘導(dǎo)小鼠ARDS模型及PDTC預(yù)處理，檢測同時(shí)段肺組織細(xì)胞凋亡因子Bcl-2、Bax及caspase-3的表達(dá)水平變化，探討PDTC影響ARDS細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制，為防治ARDS提供新的思路。
　　方法：實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為對照組、模型組和干預(yù)組。采用腹腔內(nèi)注射LPS20mg/kg復(fù)制小鼠ARDS動(dòng)物模型，干預(yù)組在注射LPS前30min腹腔內(nèi)注射PDTC120mg/kg，分別在注射LPS后4小時(shí)、8小時(shí)、

2、12小時(shí)三個(gè)時(shí)相收集標(biāo)本；對照組腹腔內(nèi)注射NS20ml/kg進(jìn)行比較。RT-PCR法檢測各組肺組織中Bcl-2、Bax及caspase-3的表達(dá)水平；熒光酶標(biāo)分析法檢測各組肺組織中caspase-3蛋白酶水平；測量各組肺組織W/D比值；檢測各組動(dòng)脈血血?dú)夥治霾⒂?jì)算氧合指數(shù)；各組肺組織行石蠟切片及HE染色觀察其病理改變。
　　結(jié)果：1、一般狀況：對照組小鼠呼吸平順、飲食正常、活動(dòng)自如；模型組小鼠腹腔注射 LPS后，呼吸急促、飲食量下

3、降、活動(dòng)減少；干預(yù)組小鼠相對模型組其呼吸較暢順、飲食量及活動(dòng)能力下降不明顯。模型組及干預(yù)組隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長其癥狀呈加重趨勢。
　　2、各組氧合指數(shù)：模型組小鼠動(dòng)脈血的PaO2/FiO2值在三個(gè)時(shí)相點(diǎn)均明顯低于對照組（P＜0.05）；干預(yù)組 PaO2/FiO2值在對照組與模型組之間；模型組及干預(yù)組隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長其PaO2/FiO2值呈下降趨勢（P＜0.05）。
　　3、各組肺組織大體標(biāo)本外觀及HE染色：對照組小鼠肺組織肉

4、眼觀察呈粉紅色；HE染色鏡下見肺泡壁結(jié)構(gòu)完整，腔內(nèi)無積液，間質(zhì)組織無炎癥性細(xì)胞浸潤。模型組可見顏色明顯加深，呈暗紅色，體積較對照組增大，表面可見出血點(diǎn)。HE染色后鏡下見明顯的肺泡壁程度不一的斷裂或破壞，肺泡腔內(nèi)與肺泡間質(zhì)中出現(xiàn)大量中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤；干預(yù)組見其體積較對照組無顯著增大，顏色呈紅色，表面少許出血點(diǎn)，HE染色鏡下見肺泡壁破壞（較模型組）明顯減輕，肺泡腔內(nèi)與肺間質(zhì)中的炎癥性細(xì)胞減少。模型組及干預(yù)組隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間延

5、長，呈加重趨勢。
　　4、各組肺組織W/D值：模型組肺組織的W/D值較對照組明顯增加（P＜0.05），干預(yù)組W/D值介于對照組與模型組之間；模型組及干預(yù)組隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長呈上升趨勢（P＜0.05）。
　　5、各組肺組織Bcl-2、Bax及caspase-3的表達(dá)水平：模型組及干預(yù)組肺組織Bcl-2表達(dá)水平均較對照組明顯增加，干預(yù)組增加程度較模型組多，模型組及干預(yù)組隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間推移呈上升趨勢（P＜0.05）。模型組肺組織Bax、c

6、aspase-3表達(dá)水平較對照組明顯升高，干預(yù)組介于對照組與模型組之間，模型組及干預(yù)組隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長呈上升趨勢（P＜0.05）。
　　6、各組肺組織caspase-3蛋白酶水平：模型組肺組織caspase-3蛋白酶水平較對照組含量增加明顯，干預(yù)組介于對照組與模型組之間，模型組及干預(yù)組蛋白酶水平隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長呈減少趨勢（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1、LPS誘導(dǎo)小鼠ARDS肺組織凋亡因子Bcl-2、Bax及caspase-3表