HSP70表達抑制對LPS所致細胞因子表達的影響及其機制研究.pdf

1、嚴重創(chuàng)傷、燒傷、敗血癥（特別是革蘭氏陰性菌敗血癥）及各種類型的休克常導致全身炎癥反應綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）發(fā)生。SIRS是臨床各科十分常見、平時及戰(zhàn)時導致死亡的危重病癥。雖然SIRS的發(fā)生機制迄今尚未完全闡明，但是LPS所致炎癥介質的表達和細胞內信號轉導通路的活化，在其發(fā)病學中的重要作用已受到廣泛關注。 本研究應用RNA干擾技術，抑制RAW264.7小鼠

2、巨噬細胞的HSP70基因表達。采用RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌脂多糖（LPS）可誘導轉空載體的RAW264.7小鼠巨噬細胞（NEO）產生大量IL-1β和IL-6等細胞因子。而用過表達HSP70的RAW264.7細胞進行實驗，發(fā)現(xiàn)HSP70抑制了LPS誘導的細胞因子表達。當抑制HSP70基因的表達后，再進行LPS刺激，則細胞因子表達增多，說明抑制HSP70的表達可促進LPS誘導的細胞因子表達。 由于NF-κB/IκB信號轉導通路

3、的活化在LPS所致炎癥反應中發(fā)揮了重要作用，我們進一步分析了HSP70表達抑制對LPS所致NF-κB信號通路活化的影響。通過Western blot等技術檢測NF-κB（p65）的核移位，我們發(fā)現(xiàn)抑制HSP70表達后，HSP70對NF-κB（p65）核移位（LPS刺激60 min）及LPS刺激20 min所致的IκB降解的抑制作用被解除。 由于IκBα的降解涉及IκBα的磷酸化，而IκBα的磷酸化是由IκB的激酶IKK以及相應的