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文檔簡介
1、目的:建立一種新型基因轉換系統(tǒng),用于檢測TP53基因(R175H)早期突變,為腫瘤的早期篩查提供依據(jù)。
方法:構建TP53基因野生型DNA模板(含NarI酶切位點)和突變DNA模板。將TP53基因野生型基因片段與突變型基因片段按照野生:突變(W:T)=1:0,100:1,300:1,1000:1的比例混合,使用高保真DNA聚合酶進行PCR擴增,過程中不斷添加限制性內切酶進行酶切消化,并對其產物進行PCR擴增后再行測序。
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