鄭州地區(qū)城市居民2型糖尿病危險(xiǎn)因素分析及SIRT1和FOXO1單核苷酸多態(tài)性與糖尿病腎病的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、第一部分鄭州地區(qū)城市居民2型糖尿病危險(xiǎn)因素分析
　　全球糖尿病的患病率隨著人口老齡化、城市化和生活方式的改變而快速增長。目前我國已超越印度成為世界上糖尿病人數(shù)最多的國家，近年來河南地區(qū)2型糖尿病的患病率隨著本省城市化及生活方式的改變而快速增長。作為一種終身性疾病，2型糖尿病易合并多器官病變，如:心腦血管病變、腎臟病變、神經(jīng)病變、視網(wǎng)膜病變等，給患者的生存質(zhì)量和生命帶來極大的威脅，同時(shí)，也給社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因此，2型糖

2、尿病的預(yù)防就顯得尤為重要。
　　2型糖尿病是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用導(dǎo)致的結(jié)果，生活方式在其發(fā)生發(fā)展中的作用舉足輕重。為此，國內(nèi)外學(xué)者也做了大量的相關(guān)研究。然而，不同種族、不同地理環(huán)境所造成的生活方式千差萬別，在不同地區(qū)人群中的研究結(jié)果也有所差異。鄭州作為河南這個(gè)人口大省的省會(huì)，探討其2型糖尿病新近的患病情況及危險(xiǎn)因素，對于我省2型糖尿病流行病學(xué)資料的完善和補(bǔ)充具有重要意義。此外，鑒于糖尿病家族史是2型糖尿病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，顯著

3、增加2型糖尿病的患病風(fēng)險(xiǎn)，有必要探討家族史相關(guān)生活方式對2型糖尿病患病風(fēng)險(xiǎn)的影響。
　　目的：
　　明確鄭州地區(qū)T2DM的患病情況及其危險(xiǎn)因素，并結(jié)合T2DM患者家族史情況，分析家族史相關(guān)生活方式對2型糖尿病患病風(fēng)險(xiǎn)的影響。
　　方法：
　　應(yīng)用本課題組承擔(dān)的中華醫(yī)學(xué)會(huì)內(nèi)分泌學(xué)分會(huì)組織的“REACTIONSTUDY”河南部分的橫斷面現(xiàn)場調(diào)查數(shù)據(jù)，采用整群抽樣的方法，選取河南地區(qū)鄭州市六個(gè)社區(qū)，年齡在30歲以上常住

4、居民（居住年限≥5年）10011人進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括問卷調(diào)查（人口學(xué)特征、糖尿病病史及家族史、行為危險(xiǎn)因素、體力活動(dòng)、飲食情況、體重變化、情緒狀況等）、體格檢查（身高、體重、腰圍、臀圍、血壓）和實(shí)驗(yàn)室檢查（空腹血糖、OGTT-2h血糖）等。對鄭州地區(qū)30歲人群2型糖尿病的患病率、危險(xiǎn)因素進(jìn)行全面分析;并應(yīng)用病例對照研究方法，從上述研究對象中選取1229例2型糖尿病患者作為病例組，8455例非T2DM人群作為NC組，按照有無糖尿病家族

5、史，進(jìn)一步將病例組及對照組分為家族史陽性組和家族史陰性組，對家族史對相關(guān)生活方式的影響，以及不同家族史群體對2型糖尿病的危險(xiǎn)因素有無不同進(jìn)行研究。資料經(jīng)EpiData3.1軟件雙人雙錄入庫，運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1.鄭州地區(qū)2型糖尿病患病率及其分布
　　鄭州地區(qū)30歲以上人群2型糖尿病不考慮抽樣權(quán)重的患病率為12.72％，經(jīng)鄭州地區(qū)2012年人口構(gòu)成調(diào)整后2型糖尿病的患病率為12.

6、01％。其中男性為12.62％，女性為12.73％，男女間2型糖尿病的患病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。漢族、少數(shù)民族患病率分別為12.79％及9.45％。漢族與少數(shù)民族間2型糖尿病的患病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。不同年齡組2型糖尿病患病率，趨勢性卡方檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=35.912,P=0.000)，2型糖尿病的患病風(fēng)險(xiǎn)有隨著年齡增高而增加的趨勢。不同職業(yè)研究對象2型糖尿病的患病率，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.0

7、5)。不同文化程度研究對象的2型糖尿病的患病率，趨勢性卡方檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=35.813，P=0.000），2型糖尿病的患病率有隨著文化程度增高而增加的趨勢。
　　2.鄭州地區(qū)2型糖尿病的危險(xiǎn)因素分析
　　多因素logistic回歸分析顯示，在排除了其它研究因素影響后，糖尿病家族史(OR=2.396，95％CI:1.840，3.120)、收縮壓水平(OR=1.535，95％CI:1.190，1.979)、腰臀比(O

8、R=1.632,95％CI:1.343,1.984)、文化程度(OR=1.121，95％CI:1.012,1.241)、薯類攝入頻率(OR=1.339，95％CI:1.115，1.994)是鄭州地區(qū)男性罹患2型糖尿病的危險(xiǎn)因素。
　　而糖尿病家族史(OR=2.132，95％CI:1.783，2.550)、年齡(OR=1.278，95％CI:1.124，1.784)、飲酒(OR=1.260，95％CI:1.077，1.476)、收縮

9、壓水平(OR=1.840，95％CI:1.526,2.220)、腰臀比(OR=1.968,95％CI:1.648，2.350)、文化程度(OR=1.154,95％CI:1.075，1.240)、過度薯類攝入(OR=1.264，95％CI:1.107，1.517)則是鄭州地區(qū)女性2型糖尿病的危險(xiǎn)因素。而水果攝入頻率(OR=0.839，95％CI:0.735，0.957)則是鄭州地區(qū)女性患2型糖尿病的保護(hù)性因素。
　　3.糖尿病家族史

10、對生活方式的影響因素分析
　　DM家族史陽性者罹患2型糖尿病的發(fā)病年齡要顯著早于家族史陰性者。調(diào)整年齡及性別后，DFH(+)及DFH(-)組中生活方式與T2DM的關(guān)系分析表明:家族史陽性組中T2DM相關(guān)的危險(xiǎn)因素要少于家族史陰性組，無論家族史陽性還是陰性人群都有幾個(gè)共同的危險(xiǎn)因素如薯類攝入＞100g/天、高血壓、WHR（女性）＞0.85，但是對于所有糖尿病家族史陰性的研究對象，可以看到T2DM常見的吸煙、飲酒、肥胖依然為其危險(xiǎn)因素

11、，而在家族史陽性人群中這些眾所周知的危險(xiǎn)因素與T2DM基本無關(guān)，但是被動(dòng)吸煙、食用腌菜等這些相對來說比較隱蔽的因素卻是T2DM的危險(xiǎn)因素。同時(shí)，并沒有發(fā)現(xiàn)高血壓和薯類攝入等危險(xiǎn)因素增加2型糖尿病的患病危險(xiǎn)的ORs值在家族史陽性組更低，有些ORs值甚至比家族史陰性組的更高。經(jīng)常攝入鮮榨果蔬菜汁，則無論對DFH(+)人群還是對DFH(-)人群，都是2型糖尿病的保護(hù)性因素，其OR值和95％CI分別為(OR=0.48,95％CI:0.29,0.

12、79)和(OR=0.46,95％CI:0.36,0.60)。
　　結(jié)論：
　　1.鄭州地區(qū)30歲以上人群T2DM患病率較高，高于全國同期水平，且發(fā)展速度快，呈逐年上升趨勢，在不到20年的時(shí)間里，2型糖尿病的患病率增長了近3倍。
　　2.2型糖尿病家族史、收縮壓水平、腰臀比、文化程度和過度薯類攝入是鄭州地區(qū)男性2型糖尿病的危險(xiǎn)性因素。2型糖尿病家族史、飲酒、收縮壓水平、腰臀比、文化程度、高薯類攝入頻率是鄭州地區(qū)女性2型糖

13、尿病的危險(xiǎn)性因素，而高果蔬類飲食則是鄭州地區(qū)女性2型糖尿病的保護(hù)性因素。
　　3.DM家族史陽性者罹患2型糖尿病的發(fā)病年齡要顯著早于家族史陰性者;家族史陽性組中T2DM相關(guān)的危險(xiǎn)因素要少于家族史陰性組中;高血壓及過度薯類膳食是家族史陽性及陰性人群患2型糖尿病的共同危險(xiǎn)因素，而經(jīng)常攝入鮮榨果蔬菜汁則是共同的保護(hù)因素;而且，高血壓和薯類攝入等危險(xiǎn)因素增加2型糖尿病的患病危險(xiǎn)的ORs并沒有發(fā)現(xiàn)在家族史陽性組更低，說明2型糖尿病家族史對生

14、活方式具有一定的影響，家族史陽性群體可以通過改變不良生活方式降低自身對環(huán)境危險(xiǎn)因素的易感性。
　　第二部分SIRTI和FOXO1單核苷酸多態(tài)性與2型糖尿病腎病的關(guān)聯(lián)研究
　　糖尿病腎病是糖尿病最常見、最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一。在美國，每年由糖尿病腎病發(fā)展為終末期腎病的患者約占全部終末期腎病患者的40％，在我國也是終末期腎功能衰竭的第二大原因。然而，糖尿病的發(fā)生發(fā)展仍然存在許多尚不明了的的未知因素。傳統(tǒng)的代謝性因素如血糖和或血

15、壓控制不良，并不能解釋所有糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展。即使是那些長期血糖控制良好的患者中，同樣也能發(fā)生糖尿病腎病。此外，糖尿病腎病在不同種族間發(fā)病率顯著不同，且具有典型的家族聚集性，以上種種現(xiàn)象均表明:遺傳因素在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起著不容忽視的作用。
　　SIRT1(silentmatingtypeinformationregulation2homolog1)一種NAD+依賴的去乙?；?，可通過去乙酰化而調(diào)節(jié)組蛋白及大量的包括FOX

16、O1(forkheadboxproteinO1)在內(nèi)的非組蛋白轉(zhuǎn)錄因子的功能，從而參與調(diào)節(jié)體內(nèi)多種生物學(xué)功能，如凋亡，線粒體合成，炎癥，糖脂代謝，自噬及對抗應(yīng)激等。既往的研究表明，SIRT1和FOXO1在糖尿病及糖尿病腎病的發(fā)展中起到重要作用。本課題組之前的研究也證實(shí)，糖尿病腎病大鼠體內(nèi)隨著MDA含量、腎小球膠原和纖連蛋白水平的顯著增高，F(xiàn)OXO1的表達(dá)水平明顯下降，而以白藜蘆醇上調(diào)SIRT1基因表達(dá)后，可以再次上調(diào)FOXO1的活性，因

17、此推測SIRT1/FOXO1通路在糖尿病腎病(Diabeticnephropathy，DN)治療中可能發(fā)揮一定的作用。但迄今為止，有關(guān)SIRT1基因單核苷酸多態(tài)性(SNPs)與糖尿病腎病相關(guān)性的研究甚少，僅Maeda等于2011年首次報(bào)道SIRT1的4個(gè)SNPs與日本人群的2型糖尿病腎病的易感性相關(guān)。而FOXO1SNPs是否與糖尿病腎病相關(guān)尚未見報(bào)道。
　　目的：
　　研究SIRT1基因、FOXO1基因單核苷酸多態(tài)性，以及基

18、因-環(huán)境危險(xiǎn)因素與河南地區(qū)漢族人群2型糖尿病腎病(type2Diabeticnephropathy，T2DN)的關(guān)聯(lián)，為早期篩選糖尿病腎病高危人群，制定個(gè)體化治療方案提供依據(jù)。
　　方法：
　　本研究共選取來自河南地區(qū)幾家三級甲等醫(yī)院的1066例2型糖尿病患者作為研究對象。采用病例對照的方法，以654例2型糖尿病腎病患者作為糖尿病腎病組(DN組，n=654)，412例2型糖尿病程10年以上，無視網(wǎng)膜病變，無糖尿病腎病(UAE

19、R＜30mg/24h或＜20μg/min)的2型糖尿病患者作為對照組(Control組，n=412)。并根據(jù)患者尿白蛋白排泄率(UAER)進(jìn)一步將糖尿病腎病組分為三個(gè)亞組:1）DN3組:早期腎病組，30mg/24h≤UAER＜300mg/24h或20μg/min≤UAER＜200μg/min，n=212;2）DN4組:臨床腎病組，UAER＞300mg/24h或＞200μg/min，n=150;3）DN5組:腎功能不全組(GFR＜90ml

20、/min)，n=292，其中包含180例終末期腎病患者。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)基因測序的方法，檢測SIRT1基因三個(gè)標(biāo)簽SNPs位點(diǎn)(rs3818292，rs4746720，rs10823108)和FOXO1基因的兩個(gè)標(biāo)簽位點(diǎn)(rs2721068，rs17446614)的基因分型，探討SIRT1和FOXO1基因單核苷酸多態(tài)性以及基因-環(huán)境交互作用與河南地區(qū)漢族人群遺傳易感性的關(guān)聯(lián)。
　　利用SP

21、SS17.0軟件對樣本的一般特征進(jìn)行描述，對五位點(diǎn)基因型分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;利用在線SHEsis軟件進(jìn)行哈溫平衡、連鎖不平衡和兩位點(diǎn)單體型分析;采用Logistic回歸法比較各環(huán)境因素在病例組和對照組之間分布頻率的差異，利用多因子降維法(MDR)及Logistic回歸法分析基因-基因、基因-環(huán)境對糖尿病腎病的交互作用。
　　結(jié)果：
　　1.SIRT1基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病的關(guān)系
　　單位點(diǎn)分析表明，SIRT1基因rs

22、10823108位點(diǎn)GG基因型攜帶者患T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是AA基因型攜帶者的1.5倍，(OR=1.5，95％CI:1.03-2.66);GG+AG基因型攜帶者患T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是AA基因型攜帶者的1.59倍，(OR=1.59，95％CI:1.11-2.78):而且，將DN3組、DN4組與Control組相比時(shí)，這種差異依然存在，說明SIRT1基因rs10823108位點(diǎn)GG基因型為T2DN的易感基因。
　　在DN4組與對照組相比

23、時(shí)發(fā)現(xiàn)，rs3818292位點(diǎn)GG基因型攜帶者患T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是AA基因型攜帶者的0.21倍，(OR=0.21，95％CI:0.07-0.71);GG基因型攜帶者患T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是(AA+AG)基因型攜帶者的0.22倍(OR=0.22，95％CI:0.07-0.72)，G等位基因攜帶者患T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是A等位基因攜帶者的0.64倍，(OR=0.64，95％CI:0.43-0.96)，說明SIRT1基因rs3818292位點(diǎn)的

24、GG基因型，G等位基因可能為T2DN的易感基因，尤其可能參與了T2DN的病情進(jìn)展;未發(fā)現(xiàn)SIRT1基因rs4746720位點(diǎn)基因多態(tài)性在病例組、各病例亞組及對照組之間的基因型頻率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。未發(fā)現(xiàn)SIRT1基因單體型在病例組與對照組之間的基因型頻率存在顯著性差異。
　　2.FOXO1基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病的關(guān)系
　　在DN組與Control組，DN各亞組與Control組比較時(shí)，均發(fā)現(xiàn)FOXO1基因rs17446614

25、位點(diǎn)GG基因型攜帶者與AA基因型攜帶者相比，可以降低T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);GA基因型攜帶者與AA基因型攜帶者相比，可以降低T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);等位基因G攜帶者與等位基因A攜帶者相比，可以降低T2DN的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（具體結(jié)果見文中詳述），說明該位點(diǎn)是T2DN的易感基因，并參與其發(fā)生發(fā)展始終。未發(fā)現(xiàn)rs2721068在DN組和Control組之間的基因型頻率有顯著性差異(P＞0.05)。單體型分析發(fā)現(xiàn):由FOXO1rs17446614位點(diǎn)和rs2

26、721068位點(diǎn)組成的GT、GC單體型可以顯著降低T2DM患者合并DN的風(fēng)險(xiǎn)，OR及95％CI分別為0.77(0.63-0.93)和0.78(0.65-0.93)。
　　3.SIRT1和FOXO1的基因多態(tài)性與環(huán)境因素的交互作用
　　FOXO1rs17446614位點(diǎn)和高血壓之間形成最優(yōu)交互作用模型，顯著增加DN的患病風(fēng)險(xiǎn)(OR:2.85，95％CI:2.16，3.78)。
　　4.多因素分析2型糖尿病腎病的相關(guān)危險(xiǎn)因

27、素
　　Logistic回歸分析結(jié)果表明:吸煙，高血壓，HbA1C，總膽固醇，高密度脂蛋白膽固醇與T2DN之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)，其OR值及95％CI分別為:1.46(1.07-1.98),p＜0.01;2.08(1.6-2.68),p=0.02;1.06(1.02-1.10),P＜0.01;1.21(1.11-1.33),p＜0.01;0.48(0.33-0.69),p＜0.01;未發(fā)現(xiàn)患者年齡，性別，BMI，飲酒，血清甘油三酯，低密

28、度脂蛋白膽固醇，DM家族史等因素與DN的發(fā)生之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)論：
　　SIRT1基因、FOXO1基因可能是河南漢族人群2型糖尿病腎病的遺傳易感基因，其中SIRT1基因的rs10823108位點(diǎn)GG基因型、(GG+AG)基因型，可能增加2型糖尿病腎病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);SIRT1基因rs3818292位點(diǎn)突變基因型GG、等位基因G和FOXO1基因rs17446614位點(diǎn)GG基因型、GA基因型和等位基因G可能降低2型糖尿病腎