藥物分析hplc

1、2024/3/10,一、液相色譜儀器 high performance liquid chromatograph,2024/3/10,液相色譜儀（2）,2024/3/10,液相色譜儀（3）,2024/3/10,液相色譜儀（4）,2024/3/10,二、高效液相色譜法的特點 feature of HPLC,特點：高壓、高效、高速 高沸點、熱不穩(wěn)定有機及生化試樣的高效分離分析方法。,2024/3/10,三、流程及主要部件

2、process and main assembly of HPLC,1.流程,2024/3/10,2.主要部件,(1) 高壓輸液泵主要部件之一，壓力：150～350×105 Pa。為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液體的流動相高速通過時，將產(chǎn)生很高的壓力，因此高壓、高速是高效液相色譜的特點之一。應具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、流量穩(wěn)定可調(diào)、耐腐蝕等特性,（動畫）,2024/3/10,(2)梯度淋洗裝置,外

3、梯度: 利用兩臺高壓輸液泵，將兩種不同極性的溶劑按一定的比例送入梯度混合室，混合后進入色譜柱。,內(nèi)梯度: 一臺高壓泵, 通過比例調(diào)節(jié)閥,將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。,2024/3/10,(3) 進樣裝置,流路中為高壓力工作狀態(tài)， 通常使用耐高壓的六通閥進樣裝置， 其結(jié)構(gòu)如圖所示：,2024/3/10,(4) 高效分離柱,柱體為直型不銹鋼管，內(nèi)

4、徑1～6 mm，柱長5～40 cm。發(fā)展趨勢是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。,2024/3/10,(5) 液相色譜檢測器,a. 紫外檢測器 應用最廣，對大部分有機化合物有響應。 特點： 靈敏度高； 線形范圍高； 流通池可做的很?。?mm × 10mm ，容積 8μL）； 對流動相的流速和溫度變化不敏感； 波長可選，易于操作；

5、 可用于梯度洗脫。,2024/3/10,b. 光電二極管陣列檢測器,紫外檢測器的重要進展； 光電二極管陣列檢測器：1024個二極管陣列，各檢測特定波長，計算機快速處理，三維立體譜圖，如圖所示。,2024/3/10,2024/3/10,光電二極管陣列檢測器,2024/3/10,c. 示差折光檢測器（differential refractive index detector）,除紫外檢測器之外應用最多的檢測器；

6、 可連續(xù)檢測參比池和樣品池中流動相之間的折光指數(shù)差值。差值與濃度呈正比；,通用型檢測器（每種物質(zhì)具有不同的折光指數(shù)）； 靈敏度低、對溫度敏感、不能用于梯度洗脫； 偏轉(zhuǎn)式、反射式和干涉型三種；,2024/3/10,示差折光檢測器,2024/3/10,d. 熒光檢測器（fluorescence detector）,高靈敏度、高選擇性； 對多環(huán)芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物