黃連屬植物遺傳多樣性分析和鐵皮石斛原球莖細(xì)胞學(xué)觀察.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以峨眉黃連在內(nèi)的11種黃連屬植物為樣本，以RAPD(Random AmplifiedPolymorphic DNA)為技術(shù)手段，對(duì)黃連屬種間親緣關(guān)系、遺傳多樣性以及造成基因組差異的原因進(jìn)行了研究，尤其對(duì)峨眉黃連種內(nèi)四個(gè)居群的多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行了基因流和遺傳距離的分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.利用RAPD對(duì)11種黃連屬植物的基因組進(jìn)行擴(kuò)增，82條隨機(jī)引物共擴(kuò)增出771條帶，每個(gè)引物平均擴(kuò)增9.5條帶，多態(tài)性位點(diǎn)688個(gè)，占總擴(kuò)

2、增帶數(shù)的89.37％。說(shuō)明黃連屬種間具有較為豐富的遺傳多態(tài)性。對(duì)于4個(gè)生境采集的峨眉黃連，共擴(kuò)增出510條帶，其中198個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，平均多態(tài)率為38.8％。與種間遺傳水平相比，峨眉黃連種內(nèi)遺傳多樣性有限。
　　 2.根據(jù)RAPD結(jié)果進(jìn)行的UPGMA聚類(lèi)分析結(jié)果與傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)結(jié)果一致。味連與其他三種黃連的遺傳距離最遠(yuǎn)，單獨(dú)分為一支。其次是兩個(gè)生境的三角葉黃連聚為一支，而且這兩個(gè)樣本之間的相似性極高。在相似性系數(shù)大于0.84的水

3、平上，草連和峨眉黃連分化為兩支。其中，黃灣的樣本和三道河的雙翼型峨眉黃連聚為一支，白崖、人棚子溝的樣本和三道河的鳳尾型樣本聚為一支。
　　 3.通過(guò)POPGENE對(duì)四個(gè)生境的峨眉黃連的基因流進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示居群水平上的多態(tài)率為26％，shannon信息指數(shù)0.1852，遺傳分化指數(shù)(Gst)為0.3680，基因流(Nm)為0.2912。這表明發(fā)生在峨眉黃連基因組內(nèi)的多數(shù)變異存在于居群內(nèi)，居群間缺少基因交流。相對(duì)較低的基因流可

4、能是造成居群間遺傳分化的主要原因，但是我們也不能排除遺傳漂變的因素。對(duì)于峨眉黃連的基因組的遺傳結(jié)構(gòu)，生長(zhǎng)環(huán)境仍然起到主導(dǎo)作用。對(duì)于唯一存在分類(lèi)不一致的樣本5(鳳尾型，三道河)，我們推測(cè)不同表型的個(gè)體之間存在微小的遺傳差異，但這種差異不足以影響整個(gè)居群的進(jìn)化。
　　 以鐵皮石斛原球莖為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)植物組織石蠟切片的技術(shù)手段，對(duì)鐵皮石斛從球形胚到萌發(fā)過(guò)程中體胚中頂部的形態(tài)發(fā)生過(guò)程進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，由愈傷組織培養(yǎng)15天左右，