優(yōu)質(zhì)HMW-GS基因(H1Dx5及H1Bx13)對山東、河南小麥主栽品種的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、小麥?zhǔn)鞘澜缟献钪匾募Z食作物之一，也是人類主要的食物來源之一。高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)的組成與小麥面粉加工品質(zhì)密切相關(guān)。通過遺傳轉(zhuǎn)化將優(yōu)質(zhì)高分子量麥谷蛋白亞基基因轉(zhuǎn)入普通高產(chǎn)小麥品種，提高這些主栽小麥品種的加工品質(zhì)，在今后的小麥的品種育種中具有廣闊的前景。
　　 本實驗室從普通小麥濟南177(Triticum aestivumL)與長穗偃麥草(Agropyron elongatum)不對稱體細胞融合的可育優(yōu)質(zhì)后代中，

2、分離并克隆到了多個優(yōu)質(zhì)的HMW-GS亞基。其中H1B(x)13和H1D(x)5亞基基因已經(jīng)證明與較好的面粉加工品質(zhì)有關(guān)。我們以植物表達載體pCAMBIA3301為框架對這些優(yōu)質(zhì)亞基構(gòu)建小麥胚乳特異性表達載體，獲得在小麥B(x)17的啟動下的H1B(x)13，H1D(x)5單價載體p3301-1-H1B(x)13和p3301-1-H1D(x)5及H1B(x)13＋H1D(x)5雙價載體p3301-1-H1D(x)5-H1B(x)13，以g

3、us基因為篩選標(biāo)記，通過本課題組的小麥農(nóng)桿菌苗端轉(zhuǎn)化專利技術(shù)對山融3號、濟麥22、鄭麥366、周麥18、周麥20、07YT2122等多個我國小麥主栽品種進行遺傳轉(zhuǎn)化，最終獲得了大量株T0代陽性植株以及T1代陽性植株。利用半粒法SDS-PAGE對171粒轉(zhuǎn)基因陽性T0代小麥種子和100粒T1代種子進行高分子量麥谷蛋白亞基組成的分析，結(jié)果并未發(fā)現(xiàn)目的蛋白的表達。然而在部分轉(zhuǎn)基因T0和T1代小麥籽粒中發(fā)現(xiàn)了原有1A(x)1亞基發(fā)生沉默及部分失

4、活現(xiàn)象，1B(x)17及1D(x)10有部分株系表達增加，1D(x)5在有些株系中也有下調(diào)。推測其可能的原因是由于外源基因的插入導(dǎo)致了內(nèi)源同源基因的表達受到了影響，但為什么不同亞基的表達所受影響不同，單基因與雙價基因?qū)ζ浔磉_的影響也不同，其機理尚需更深入的研究。
　　 另外本文利用PCR從多種小麥品種中擴增得到了1A(x)1，1B(x)7，1B(x)14，1By15，1D(x)5，1Dy10等高分子量麥谷蛋白亞基啟動子，經(jīng)測序分