硫酸核糖霉素的質(zhì)量研究.pdf

1、本文探討了氨基糖苷類抗生素—核糖霉素的質(zhì)量研究方法。核糖霉素是核糖苷鏈霉菌產(chǎn)生的抗生素，對革蘭氏陽性、陰性菌均有抑制作用，其活性較卡那霉素稍低，但毒性較小。核糖霉素結(jié)構(gòu)中不含紫外吸收基團、極性強、揮發(fā)性差，不適合采用HPLC-UV法進行檢測。中國藥典（2005年版）二部收載了硫酸核糖霉素及注射用硫酸核糖霉素，《國家藥品標準》（化學(xué)藥品地方標準上升國家標準第二冊）收載有硫酸核糖霉素注射液。日本藥局方也收載了該品種。上述藥品標準僅收載了微生

2、物法測定硫酸核糖霉素的含量，其有關(guān)物質(zhì)的檢查均未見報道。 本課題對硫酸核糖霉素的質(zhì)量研究，包括硫酸核糖霉素有關(guān)物質(zhì)檢查方法（TLC法，HPLC-ELSD法）和含量測定方法（HPLC-ELSD法）的建立，以及與傳統(tǒng)的微生物法含量測定的比較；并根據(jù)WHO對化學(xué)參考物質(zhì)的純度要求，進行了核糖霉素對照品的相關(guān)研究工作。為新版中國藥典中核糖霉素原料和制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查方法和含量測定方法的建立提供了參考，為其原料和制劑在生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制

3、提供了依據(jù)。本研究分為三個部分： 一、建立了硫酸核糖霉素中有關(guān)物質(zhì)檢查的方法。首先采用了薄層色譜法。由于各國藥典均沒有收載硫酸核糖霉素有關(guān)物質(zhì)檢查項，同時相關(guān)的文獻資料不多，建立薄層色譜法檢測其有關(guān)物質(zhì)時嘗試了多種展開系統(tǒng)，以達到最優(yōu)的分離效果。最終建立的薄層色譜條件是：以硅膠G為吸附劑，以2-丁酮-甲醇-異丙醇-濃氨水-水（10：12：3：8：2）為展開劑，用0.2％的茚三酮的水飽和正丁醇溶液作為顯色劑，在110℃干燥20mi

4、n顯色。在該色譜條件下，硫酸核糖霉素原料和注射用硫酸核糖霉素中的主成分和其它雜質(zhì)能有效分離。其次建立了HPLC-ELSD法測定硫酸核糖霉素中有關(guān)物質(zhì)的方法。國內(nèi)外已有多篇關(guān)于HPLC-ELSD法在氨基糖苷類抗生素中的應(yīng)用，但未見有關(guān)核糖霉素的報道。參考國外有關(guān)氨基糖苷類抗生素的文獻，以Dionex Acclaim C18 柱（4.6mm×250mm,5μm），以含0.8％五氟丙酸的20mmol/L醋酸銨溶液-甲醇（55：45）作流動相，

5、用蒸發(fā)光散射檢測器檢測，首次建立了硫酸核糖霉素有關(guān)物質(zhì)檢查的高效液相-蒸發(fā)光散射檢測法。所建立的有關(guān)物質(zhì)檢查方法在3.9893μg/ml～35.904μg/ml的濃度范圍內(nèi)濃度線性良好。 二、在測定硫酸核糖霉素含量方面，分別采用HPLC-ELSD法和傳統(tǒng)微生物法測定了不同廠家共5批硫酸核糖霉素原料和6批注射用硫酸核糖霉素的含量，并分析比較了兩者測定的結(jié)果。結(jié)果顯示：對于所有的樣品，采用微生物法測定的結(jié)果明顯高于HPLC-ELSD

6、法測得的結(jié)果。這與樣品中含有新霉胺等活性雜質(zhì)有關(guān)。上述結(jié)果還顯示：在硫酸核糖霉素含量測定方面，HPLC-ELSD法能有效排除活性雜質(zhì)的干擾，比微生物法具有更多的優(yōu)點。 三、建立了核糖霉素對照品的相關(guān)研究工作。根據(jù)單組分抗生素對照品的確定原則，主成分扣除有機雜質(zhì)，水分，揮發(fā)成分，灰分后為其主成分的純度。本課題選取一批硫酸核糖霉素原料，分別采用了HPLC-ELSD法測定硫酸核糖霉素主成分，GC法測定了19種有機溶劑的殘留，用減壓干燥